复旦大学分析化学AII第十章液相色谱综述.ppt

第21章 液相色谱分析法;一. HPLC与GC的区别;填充柱气相色谱柱，填料尺为80-100目(2毫米); 高效液相色谱的固定相粒度在2－10微米,因此需要很高的反压。;;Date;二.高效液相色谱法的特点 feature of HPLC;三. 液相色谱类型;1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂（固体固定相） 弱极性物质——选择强吸附剂（固体固定相） 3. 流动相的选择： “相似相溶”原则 基本原则是 极性大的试样用极性较强的流动相，极性小的则用低极性流动相。 ;极性吸附剂上有机化合物的保留顺序如下（极性强保留时间长）： 氟碳化合物饱和烃 烯烃芳烃有机卤化物醚硝基化合物腈叔胺酯醛酮醇伯胺酰胺羧酸磺酸;2. 液-液分配色谱liquid- liquid partition chromatography;液固色谱的固定相与气固色谱的相类似，但粒子更小。 液液色谱的固定相：化学键合的固定相——载体+固定液 (1).固定相的载体 a、硅胶 ⑴ 无定形全多孔硅胶 YWG ⑵ 球形全多孔硅胶 YQG ⑶ 堆积硅珠 YQG b、高分子多孔微球 YSG ;(2). 固定相的化学键合;(3). 化学键合固定相的特点;(4).正相键合相色谱法的分离条件;(5). 反相键合相色谱法的分离条件;（6）、正反相键合相色谱法的比较;(7). 液液色谱法的流动相;(b).流动相分类;(c). 流动相选择;四、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph;液相色谱仪（2）;液相色谱仪（3）;液相色谱仪（4）;1、主要部件 Main assembly of HPLC;(2). 液相色谱检测器;光电二极管阵列检测器;Date;光电二极管阵列检测器;b. 示差折光检测器（differential refractive index detector）;示差折光检测器;c. 荧光检测器（fluorescence detector）;(3). 高压输液泵 主要部件之一，压力：20-80大气压。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、流??稳定可调、耐腐蚀等特性;气相色谱分离条件：1.柱温；2.气体压力、流速;(4). 梯度淋洗装置;(5). 进样装置;(6). 高效分离柱;五. 分离类型选择 Choice of separation types