广州大学城各校区空气微生物的多样或性鉴定 实验方案.docVIP

实验广州大学城各校区空气微生物的多样性鉴定 一、目的要求 1. 掌握平板菌落成像技术革兰氏染色的方法。 2. 熟练应用革兰氏染色的方法进一步分型鉴定空气微生物。 3. 结合实验2的计数结果，综合评价广州大学城各校区空气微生态安全性。 二、基本原理 1. 平板与菌落成像 采用Tanon凝胶成像系统，选择白（黑）板和白光，调节焦距可以对平板进行整体成像，也可对菌落进行放大成像。 2. 革兰氏染色法 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医生Gram创立的。革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态特征而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏染色阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫－碘复合物被保留在细胞内而不易着色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫－碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。 革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（bas