胰岛素样生长因子-Ⅰ对豚鼠巩膜成纤维细胞影响.pdf

郑州人学2007届硕f：研究生论文 胰岛素样生长冈子．I对豚鼠巩膜成纤维细胞的影响 胰岛素样生长因子．I对豚鼠巩膜成纤维细胞的影响 研究生 王帅 导师 吕勇 郑州大学第一附属医院眼科 河南郑州450052 摘要。 背景与目的 近视是一种十分常见的眼部疾病，影响世界上大约十亿人。研究近视的发病机制对 延缓近视发展、防止近视并发症及探索治疗近视的方法都有极其重要的意义。国内外通 过对哺乳类动物近视模型和人类高度近视眼的研究发现：大多数近视的发生机制是眼球 玻璃体腔延长，巩膜在近视发展的过程中经历了主动重塑过程，其病理改变为细胞成分 减少、细胞外基质成分改变等。大量近视相关研究发现，在异常视觉信息的作用下，视 网膜、脉络膜内多种神经递质和生长因子的表达发生改变，通过一系列信号转导过程使 巩膜成纤维细胞和细胞外基质在增生代谢上发生变化。目前已有多种物质被证明可能参 与这一信号转导过程，如多巴胺、血管活性多肽、一氧化氮等，我们推测这些物质并不 是直接作用于巩膜细胞和细胞外基质，而是作为导致巩膜病理改变的异常视觉信息转导 过程中的上游信号分子，通过某种特定因子发挥对巩膜的终端调控作用。因此，寻找调 控巩膜改变的生物活性物质，并明确其作用机制是近视研究中的一个重要内容。 胰岛素样生长因子(Insulin-Likegrowthfactor,IGF)是一类多功能细胞增生调控因 子，在细胞分化、增殖及个体的生长发育中有重要的促进作用。IGF有三种配体即胰岛 素、IGF．I、IGF．II，后两者70％以上同源，与人胰岛素的结构和功能约50％相似， 1I具有相似的结构和体外活性，但体内生物学效应不尽相同，在不同组织，不同生长发 育期，IGF-l与IGF．II的作用及水平均有差异。机体许多组织细胞能够自分泌和旁分 泌IGF．1，IGF．I依赖于生长激素，可促进体外培养的多种细胞增生，促进蛋白质和 mRNA DNA的合成。我们在豚鼠形觉剥夺性近视模型的研究中发现，豚鼠巩膜中IGF．I 郊州人学2007届硕十研究，￡论文 胰岛素样乍长冈子．1对豚鼠巩膜成纤维细胞的影响 的含量显著下降，提示IGF—I可能是引起巩膜重塑的直接因子。 scleral 本研究采用体外培养豚鼠巩膜成纤维细胞(guinea pig IGF—I对巩膜成纤维细胞的影响，探讨IGF．I与近视发生机制的关系。 材料与方法 随机选取健康三色出生1～3天的豚鼠，雌雄兼用，体重80～1209。体外培养GSF， 依次进行原代GSF的形态学观察，免疫组织化学法对GSF进行波形蛋白和角蛋白的鉴 I对细胞基质金属蛋白酶．2(matrix inhibitor 剂．2(tissue ofmelalloproteinase-2，TIMP-2)表达水平的影响。 结果 1．GSF原代、传代培养生长良好，波形蛋白鉴定阳性，角蛋白鉴定阴性。 2．与对照组相比IGF—I在10．00 ng·ml。～200．00ng·ml。浓度范围内与GSF的增生呈剂 量效应关系(P0．05)，且在100．00 ng·mi。浓度时促进增生作用显著(P ng·ml。1～200 O．01)。 3．从第2天开始，实验组和对照组相比IGF，I对巩膜成纤维细胞有显著促增生作用 (P(0．05)。 4．与对照组相比浓度为lO．00ng·ml。～200．00ng·ml。的IGF—I能有效刺激巩膜成纤维 细胞胶原蛋白的合成，并呈剂量效应关系。 H 郑州人学2007膈硕卜研究生论文 胰岛素样生K冈子一I对豚鼠巩膜成纤维细胞的影响