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第四章 细胞膜与细胞表面;
第一节、细胞膜与细胞表面特化结构
第二节、细胞连接
第三节、细胞外被与细胞外基质 ;第一节 细胞膜与细胞表面特化结构;一、生物膜的基本组成成分
二、细胞膜的结构模型
三、细胞质膜的功能
四、膜骨架与细胞表面的特化结构
;一、生物膜的基本组成成分;取材方便;
在机体中以单细胞悬液的形式存在;
在细胞中没有细胞内的膜系统。
;;膜脂; 磷脂是构成膜脂的基本成分,约占整个膜脂的50%以上。磷脂又可分为甘油磷脂和鞘磷脂。
磷脂分子的主要特征是:
具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链),存在于线粒体内膜和某些细胞质膜上的心磷脂具有4个非极性尾部。
脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个碳原子组成。
常含有不饱和脂肪酸(如油酸)。;;;甘油磷脂;;鞘磷脂;;糖脂;;半乳糖脑苷脂 神经节苷脂 唾液酸;胆固醇;;脂质体(liposome);;脂质体的类型;膜蛋白;胰酶消化法;外在(外周)膜蛋白
(extrinsic/peripheral membrane proteins )
水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜表面的蛋白质分子或脂分子极性头部非共价结合,可用高盐和碱性pH条件分离。
内在(整合)膜蛋白
(intrinsic/ integral membrane proteins)
水不溶性蛋白,形成跨膜螺旋,与膜结合紧密,需用去垢剂使膜崩解后才可分离。
脂质锚定蛋白
(lipid-anchored proteins)
通过磷脂或脂肪酸锚定,共价结合。; 脂锚定蛋白可以分为两类:
糖磷脂酰肌醇(glycophosphatidylinositol,GPI)连接的蛋白,通过短的寡糖与包埋在脂双层外叶中的GPI相连而被锚定在质膜的外侧,用磷脂酶C处理细胞,能释放出结合的蛋白。许多细胞表面的受体、酶、细胞粘附分子和引起羊瘙痒病的PrPC都是这类蛋白。
另一类脂锚定蛋白与插入质膜内小叶的长碳氢链结合。目前至少发现两种蛋白(Src和Ras)是通过这种方式被锚定在质膜的细胞质面。;;膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。
跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键,或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。
某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,膜内在蛋白跨膜结构域是与膜脂结合的主要部位,具体作用方式主要有三种。;1、跨膜结构域含20个左右的AA残基形成α螺旋;
2、某些α螺旋的外侧是非极性链,内侧是极性链,可以形成特异性的离子跨膜通道;
3、 某些跨膜蛋白,如E. coli外膜上的孔蛋白和叶绿体线粒体外膜上的孔蛋白,其跨膜的结构域是β折叠,反向平行的β折叠相互作用形成非特异性的跨膜通道。
;;; 去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。
去垢剂可分为离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂(Triton X-100)
离子型去垢剂不仅可以使细胞膜崩解,使膜蛋白释放出来,而且可以破坏蛋白质内部的共价键,破坏蛋白质的空间构象。
非离子型去垢剂也可以引起膜崩解,但对于蛋白质的作用比较温和,因此为了获得有生物活性的膜蛋白时,常使用非离子型去垢剂。 ; 脱氧胆酸钠 十二烷基磺酸钠;膜糖;;二、细胞膜的结构模型;生物膜结构的特征;结构模型;;4、 1959 年J. D. Robertson 利用电子显微镜技术对各种膜结构进行了详??研究,在电镜下膜显示暗-明-暗三层结构,它由厚约3.5nm的双层脂分子和内外表面各厚约2nm的蛋白质构成,总厚约7.5nm,并提出了单位膜模型(unit membrance model)。
5、 1972年 S. J. Singer G. Nicolson 根据免疫荧光技术、冰冻蚀刻技术的研究结果,提出了“流动镶嵌模型”。
6 、1997年K.Simons等人提出脂筏模型。;;;;;目前对生物膜结构的认识:;膜的流动性;光脱色恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching,FRAP);运动方式;①脂肪酸链的链长:长链脂肪酸相变温度高,膜流动性降低。
②脂肪酸链的饱和度:不饱合脂肪酸具有较低的相变温度,脂肪酸链所含双键越多越不饱和,膜流动性就越高。
③胆固醇:在相变温度以上,限制膜的流动性;在相变温度以下,则可以增加膜的流动性。
④卵磷脂/鞘磷脂:卵磷脂
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