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《发酵工程工艺原理》复习思考题 第一章思考题： 1．何谓次级代谢产物？次级代谢产物主要有哪些种类？ 次级代谢产物：由微生物新陈代谢所产生的、对一般生命活动并不必需的代谢产物。糖苷类、多肽类、酰基类、核苷类及混杂类。 2．典型的发酵过程由哪几个部分组成？ 原始材料：菌株；培养基的碳源、氮源、微量元素以及生长因子； 上游过程：对菌种加以改造，提高生产能力或者导入外源基因等以获得工程菌； 发酵过程：发酵或生物转化，是通过优化发酵条件如温度、营养、供气量等。利用工程菌的生物合成，加工和修饰等以获得目的产物； 下游过程：是运用生物化学、物理学方法分离、纯化产品，最终将产品推向市场并获得社会或经济效益。 3.发酵工程的特点及微生物的共性. 发酵过程的特点: -发酵过程以生物体的自动调节方式进行，数十个反应过程能够象单一反应一样，在发酵设备中一次完成。 -反应通常在常温常压下进行，条件温和、能耗少，设备较简单。 原料以农副产品、再生资源（植物秸杆、木屑）为主。 -可生产复杂的化合物。 -发酵过程需防止杂菌污染（设备灭菌、空气过滤）。 -除利用微生物外，还可以用动植物细胞和酶，也可以用人工构建的遗传工程菌进行反应。 -投资少、见效快、利润丰厚。是生物工程制品的最后表达形式。 微生物的共性： (1)对周围环境的温度、压强、渗透压、酸碱度等条件有极大的适应能力。 (2)有极强的消化能力。 (3)有极强的繁殖能力。 第二章思考题： 1．发酵对微生物菌种有何要求？举例说明。 1. 能在廉价原料制成的培养基上迅速生长，并能高产和稳产所需的代谢产物。 2. 可在易于控制的培养条件下迅速生长和发酵，且所需的酶活性高。 3. 生长速度和反应速度快，发酵周期短。 4. 副产物尽量少，便于提纯，以保证产品纯度。 5. 菌种不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定性。 6. 对于用作食品添加剂的发酵产品以及进行食品发酵，其生产所用菌种必须符合食品卫生要求。 2．什么叫自然突变和诱发突变？诱变育种的实质是什么？ 自然突变：环境因素的影响，DNA复制过程的偶然错误等而导致，一般频率较低，通常为10-6-10-9 。 诱发突变：某些物理、化学因素对生物体的DNA进行直接作用，突变以较高的频率产生。 诱变育种原理： 点突变: 碱基对置换和移码突变 染色体畸变: 在染色体上发生大的变化，如断裂、重复、缺失、易位和染色体数目变化等结构变化。 3．何为转化、转导、DNA体外重组技术？举例说明在发酵工业中的应用。 转化(transformation)：（游离DNA分子+ 感受态细胞） 从供体（提供DNA的细胞）细胞中取出遗传物质，通过对受体（获得DNA的细胞）细胞的培养处理，使供体的DNA片段进入受体细胞内，与受体细胞的DNA重新组合而获得变种的一种育种方法。 转导(transduction)：（由噬菌体介导） 由噬菌体作媒介，将一个细胞的遗传物质传递给另一个细胞，从而获得高产变种的一种育种方法。 DNA体外重组技术(in vitro recombinationDNA technology) 根据需要用人工方法取得供体DNA上的基因，在体外重组于载体DNA上，再转移入受体细胞，使其复制、转录和翻译，表达出供体原有的遗传性状。 4．何为营养缺陷型？举例说明营养缺陷型的筛选方法。 营养缺陷型（auxotroph）：一种缺乏合成其生存所必须的营养物（包括氨基酸、维生素、碱基等）的突变型，只有从周围环境或培养基中获得这些营养或其前体物（precursor）才能生长。常用X–表示。 5．如何筛选抗性突变株？ 抗生素抗性突变：将菌种诱变处理，用含有某种药物的培养基挑选抗性突变体，野生的敏感菌不能在这种培养基上生长。用梯度平板法。 抗噬菌体菌株选育：诱变后用高浓度噬菌体平板筛选抗性菌株。 条件抗性突变：温度敏感突变。 6．菌种保藏目的与核心是什么？产孢子的微生物适宜用何种保藏方法？ 目的: 保证菌种不发生遗传变异、无污染和保持活力。 核心：人工创造条件（如低温、干燥、缺氧、和缺乏营养物质），使菌种的代谢活动处于不活动状态。 1．酵母菌：一般采用定期移植斜面低温保藏法，将酵母接种于麦芽汁琼脂斜面上，放置低温处，每隔几个月移植一次。也可采用石蜡油封藏法。 2．霉菌：采用砂土管保藏法。此法特别适宜于产孢子或芽孢的微生物。 3．细菌和放线菌：一般细菌采用冻干法为佳，放线菌可采用冻干法和砂土管法保藏。 7．造成菌种退化的原因是什么？生产中如何防止菌种的退化？ 菌种退化的原因：保藏方法不妥、保藏操作不当、传代不当、培养基不适、回复突变。 防止菌种退化的措施 从菌种选育方法上考虑 1)进行充分的后培??及分离纯化