2细菌的生长条件和致病性.pptVIP

包括荚膜、粘附素和侵袭性物质等。 * * 有菌部位的标本，如痰液、粪便等可直接涂片。无菌部位的标本，如脑脊液、腹水等，取适量离心后，取沉渣涂片染色。 * 菌液涂片时，用接种环沾取菌液点在载玻片上，标本可直接在玻片上涂布；菌落涂片时，先取生理盐水一滴，置玻片上，用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥，并经火焰固定，固定的温度不宜过高，以玻片背面接触手背不烫为准，否则可能使细菌形态改变。将固定后的涂片进行染色。 * 3． 染色方法： （1）加上Crystal violet(,用自来水冲洗之（2）加上Gram Iodine(碘液)后染色3-5秒或更久，之后用自来水冲洗之（3）以Decolourizer（丙酮酒精）脱色约5-10秒，并用自来水冲洗之 （4）加上Safranin（稀释沙黄），染色3-5秒或更久，之后用自来水冲洗之 （5）吸干或在空气中凉干后，置油镜镜检。 4．结果观察： * * * * * 致病菌由局部侵入血流，并在其中极少量繁殖，只是短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位再进行繁殖而致病。 细菌不侵入血流，只在局部繁殖，外毒素进入血循环，经血到达易感的组织及细胞，引起特殊的全身症状。（白喉、破伤风） 毒血症： 菌血症： 致病细菌由局部侵入血流，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身性严重中毒的症状，如高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大等。 败血症： 脓毒血症： 化脓性细菌侵入血流，在其中大量繁殖，并通过血流扩散至宿主体的其他组织或器官，产生新的化脓病灶。 第三节 细菌染色与消毒灭菌 一、细菌染色 [革兰染色法具体操作] 1．标本处理： 直接涂片 取沉渣涂片 [革兰染色法具体操作] 2．涂片制作： 直接在玻片上涂布或生理盐水中涂布 自然干燥 固定 [革兰染色法具体操作] 3．染色： 结晶紫染色，水洗 碘液染色，水洗 丙酮酒精脱色，水洗 稀释沙黄复染，水洗 吸干或晾干，镜检 G+菌染成紫色，有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏阳性 G— 菌染成红色，弧菌、螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈革兰氏阴性 ① 鉴定细菌 ② 为抗生素的选择提供依据 ③ 与细菌的致病性有关，革兰氏阳性菌多以外毒素致病，革兰氏阴性菌多以内毒素致病 革兰染色法临床意义 二、消毒灭菌 消毒 ： 杀灭物体上或环境中病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌芽胞的或非病原微生物。 灭菌 杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物 防腐： 体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 无菌： 不存在任何活菌的意思。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 抑菌： 抑制体内、体外细菌生长繁殖的方法 （一）物理消毒灭菌法 消毒灭菌的物理因素 热力 辐射 超声波 滤过 干燥 低温 1、热力灭菌法 湿热80℃经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌 原理： 多数无芽胞细菌经55-60℃作用30-60min后死亡 分类： 干热灭菌法、 湿热灭菌法 干热灭菌法 焚烧：废弃物品、动物尸体。 烧灼：接种环、试管口灭菌。 干烤：160-170℃2h 玻璃器皿、瓷器等。 红外线：1-10?m波长最强，但只在照射 到的物体表面产生热效，医疗 器械的灭菌。 脱水干燥，使大分子变性 湿热灭菌法 巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏。61.1-62.8℃30min或71.1℃15-30s，一般用于酒类、牛乳等的消毒。 煮沸法：100 ℃5min杀灭繁殖体，1-2h杀灭芽胞，加入2%的碳酸钠，促进芽胞的杀灭，防止金属器皿生锈，一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。 湿热灭菌法 流动蒸汽消毒法：常压蒸汽消毒法，100 ℃15-30min杀灭繁殖体，但芽胞不被全部杀灭。 间歇蒸汽灭菌法： 100 ℃加热15-30min，37℃过夜，连续三次，用于含糖、牛奶等培养基。 高压蒸汽灭菌法：压力103.4kPa（1.05kg/cm2)， 121.3℃，15-30min，一般培养基、生理 盐水、手术敷料等物品。 湿热灭菌比干热效果好 湿热灭菌时，菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时，菌体吸收水分，蛋白质含水愈多，凝固所需温度降低。 湿