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一、 菌种的衰退
1.菌种衰退的现象
(1).菌种衰退是指由于自发突变的结果,而使某物种原有的一系列生物学性状发生量变或质变的现象。常见的衰退现象:
菌落和细胞形态的改变;
生长速度缓慢,产孢子越来越少;
代谢产物生产能力下降;
致病菌对宿主侵染能力下降;
对外界不良条件抵抗力减弱等。;;3。菌种衰退的防止: ①控制传代次数(一般在DNA的复制过程中,碱基的错配率是5x10-4,自发突变的频率为10-8~10-9,采用良好的菌种保藏方法,可以减少移种和传代的数); ②创造良好的培养条件; ③利用不易衰退的细胞移种传代(对丝状微生物而言,通常采用稳定的单核孢子进行接种); ④采用有效的菌种保藏方法。 ⑤讲究菌种选育技术 ⑥定期进行分离纯化;二、 菌种的复壮1、复壮 使衰退的菌种恢复原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种???发生衰退的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找出未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种 由此可见,狭义的复壮;;5.2、菌种保藏:(1) 目的:①存活,不丢失,不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种(2) 原理:选用优良的纯种,(最好是休眠体,如分生孢子、芽胞等),创造降低微生物代谢活动强度,生长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件。(其环境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养 以及添加保护剂等); 菌 连续在培养基上(内)移种
种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上(内)移种
保 固体斜面
藏 湿法 半固体琼脂柱
方 休眠态 液体介质(蒸馏水、糖液、其它溶液)
法 干法 藏在玻璃管内
吸附在合适的载体上;①低温保藏法方法:菌种管置4℃冰箱保藏,定时传代 原理:低温下,微生物代谢强度明显下降 。②石蜡油低温保藏法:橡皮塞取代棉塞、加石蜡油。;④真空冷冻干燥法
加有保护剂的菌悬液在冻结状态下予以真空干燥。
适用于各种微生物,便于大量保藏,菌种存活时间长,是目前最好的保藏方法。
⑤液氮超低温保藏法
将菌种置于保护剂中,预冻后保存在液氮超低温冰箱中( -196℃)。
适用于各种微生物的较理想的保藏方法。
;菌种保藏机构的任务:广泛收集科研和生产菌种、菌株,并加以妥善保管,使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。
菌种保藏机构:
中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM)
美国的典型菌种保藏中心(ATCC)
英国国家典型菌种保藏所(NCTC)
法国里昂巴斯德研究所(IPL)
;干法保藏菌种的方法;几种常用菌种保藏方法的比较
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