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什么是转基因食品?
转基因食品是通过遗传工程改变植物种子中的脱氧核糖核酸,然后把这些修改过的再复合基因转移到另一些植物种子内,从而获得在自然界中无法自动生长的植物物种。上世纪 80年代末,科学家们开始把10多年分子研究的成果运用到转基因食品上,1995年成功地生产出抗杂草黄豆,并在市场上出售。又经过11年的努力,现在他们利用基因技术已批量生产出抗虫害、抗病毒、抗杂草的转基因玉米、黄豆、油菜、土豆、西葫芦等。目前,转基因食品的主要产地是美国、加拿大、欧盟、南非、阿根廷等。
转基因食品是新事物,大多数人对它了解甚少,加之宣传不够,使人们对转基因食品的安全性存有怀疑。国际上,尤其是西欧出现了强烈抵制转基因食品的潮流。欧盟对转基因食品的生产和销售制定了一系列法规,要求基因改变不得超过基因总量的 1%,市场上出售的转基因食品必须贴标签,还要求有关国际机构对转基因食品的无害性及其对环境的影响进行科学检验。
对转基因食品无害性的评估主要有以下几方面:是否有毒性、引起过敏反应、营养或毒性蛋白质的特性、注入基因的稳定性、基因改变引起的营养效果及其他不必要的功能等。对人类健康而言,专家们认为,主要应审查转基因食品有无毒性及对环境的影响。
专家们认为,由于转基因作物能更好地防治病虫害,抵御干旱,提高产量,营养成分高,因此发展前景十分广阔。到 2015年,全球人口将增至90亿,只有提高农业生产率才能满足人类对食品的需求,而现代生物技术无疑是提高农业生产率的重要手段之一。人们还可利用基因技术生产速生鱼类和医药工业所需的疫苗等,以满足人类的生活需要。但专家们也强调,发展转基因食品必须有严格监督、科学检验、国际立法,以避免它对人类健康和环境造成损害。
转基因大豆定性检测方法介绍
1、检测样品:
豆粕,
编号:sample 1、sample 2、sample 3、sample 4
2、核酸提取:
各取5g样品,分别用研钵研磨至粉末状,再各取0.5g作为实验材料,使用试剂盒提取基因组DNA(结果见图1)。
图1 样品提取基因组DNA电泳图
Lane1: Sample 1 Lane2: Sample 2
Lane3: Sample 3 Lane4: Sample 4
M: λ-HindIII digest
3、转基因大豆定性PCR检测方法
3、1 原理
采用PCR法,在同一个反应体系中同时加入扩增Roundup Ready(CP4 EPSPS)大豆重组基因和内源基因(Actin 蛋白基因)的引物,通过重组基因的是否被扩增来判断样品是否为转基因大豆,通过内源基因是否被扩增来监控PCR反应是否正常进行,从而防止假阴性的结果。
此检测方法操作简单、成本低,可以对转基因大豆进行定性分析,经大量实验结果证明,此方法的GMO(genetically modified organism,转基因生物)混入率的检出界限为0.1%。
3.2 仪器及试剂
仪器: TaKaRa PCR Thermal Cycler DICE (TaKaRa Code:TP600)
试剂: PCR Screening Kit for GM Soybean Ver.2.0 (TaKaRa Code:DRR201A)
3.3 扩增基因及片断长度
重组基因 : CP4 EPSPS 570bp
内源基因: Actin蛋白基因 225bp
3.4 反应体系及反应条件:
反应体系:GM-Soybean PCR Mixture 1: 20μI
GM-Soybean PCR Mixture 2: 5μI
样品DNA(约50ng)
or TEST template for GM-Soybean
or dH2O 1μI
dH2O 24 μI
50μI
反应条件:
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