MultiplexPCRMastermix使用说明书.docVIP

北京聚合美生物科技有限公司 Mei5 Biotechnology, Co., Ltd 北京市海淀区学院路甲5号768创意园B-1211 热线电话： （86）010Multiplex PCR Mastermix 使用说明书 产品名称 单位 货号 2xMultiplex PCR Mastermix 1ml MF075-01 2xMultiplex PCR Mastermix 5×1ml MF075-05 【储存条件】 长期保存，请置于-20?C，有效期24个月。经常使用，可置于2-8?C保存至少六个月。 【产品简介】 Multiplex PCR MasterMix，是由GoldStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程，只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重PCR反应。本品中所含的GoldStar DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶，可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。酶的激活须在95°C下孵育10分钟此酶与??提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合，使反应体系中所有的引物都能有效延伸，无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer，有助于实现“困难”模板（比如高GC含量的模板）的高效扩增。Multiplex PCR MasterMix适用于各种类型的多重PCR反应，比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。 【产品组份】 产品名称 MF075-01 MF075-05 2xMultiplex PCR Mastermix 1ml 5x1ml ddH2O 1ml 5x1ml 【质量控制】 经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；2-8?C存放三个月，活性无明显改变。 【所需试剂】 使用者仅需准备PCR反应的模板、引物和蒸馏水等。 【使用方法】 以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。 按下表配制PCR反应体系 注意：引物设计时，尽量减小各引物的Tm间的差值，差值尽量控制在5?C以内。各引物浓度请以终浓度0.05-0.2 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性扩增时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。 建议的PCR条件 注意： 1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5?C，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。 2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的GoldStar DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。 3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 4）本产品在预变性95?C，10 min条件下实现酶的活化。 【备注】 本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。