实验：物质的鉴定.pptVIP

* 实验：生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 日期：2009.9.18 第6课时 重点： 1、实验原理； 2、斐林试剂与双缩脲试剂使用方法比较； 3、实验操作中的注意事项。 难点： 实验原理； 1、原理：课本P18—某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 2、所需试剂的名称及作用 斐林试剂：把还原性糖染成砖红色； 双缩脲试剂：把蛋白质染成紫色； 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）：把脂肪微粒染成橘黄色（或红色） 50%酒精：洗去浮色。 甲液：0.1g/ml的NaOH溶液 乙液：0.05g/mlCuSO4溶液。要现配现用 A液：0.1g/ml的NaOH溶液 B液：0.01g/mlCuSO4溶液。先加A液，后加B液。 3、实验材料的选择 （1）含有丰富被鉴定的物质； （2）是否出现颜色掩盖； （3）操作的简便性 如：梨、苹果；大豆、蛋清；花生、蓖麻、芝麻 如：如番茄不适宜用于鉴定还原糖 如：如芝麻不适宜用于鉴定脂肪 4、检测的方法与步骤：详见课本P18 5、实验操作中的注意事项。 练习 练习 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用切片在显微镜下观察脂肪时，要考虑材料中脂肪的含量和是否容易进行切片操作。如花生与芝麻哪个材料好？ 观察脂肪的装片不宜久放或实验时间不宜过长。原因时间太长，油滴会溶解在乙醇中。 蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 斐林试剂要现配现用，并且等量的甲液和乙液同时加入——目的是生成新鲜的Ca(OH)2； 双缩脲试剂要现配现用，并且A液和B液分别加入——目的是创造碱性环境； 注意：斐林试剂和双缩脲试剂的联系与区别 鉴定还原性糖的过程需要沸水浴加热才能生成砖红色沉淀； 取材时要考虑材料中被检物质的丰富含量的程度及是否出现颜色干扰等；如番茄鉴定还原糖好吗 苹果或梨组织液必须临时制备，原因苹果中多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 练习 练习 1、现有下列生物材料：①苹果 ②黄豆种子 ③梨 ④花生种子 ⑤蛋清 ⑥马铃薯块茎。最适于用来鉴定还原性糖的有（　　） A、①③⑥ B、①②③　C、①③　D、③④ C 2.某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是： . 叶绿体中的色素会遮盖反应的真实颜色 过关练习 3．在做生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，对实验材料的选择叙述，错误的是???????? A．甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行还原性糖的鉴定 B．花生的种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料? C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料? D．鸡蛋含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 A 4.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是( ) A.都含有NaOH溶液和CuSO４溶液 B.斐林试剂的配制是将4～5滴0.05g/mL的CuSO４溶液滴入2mL 0.1g/mL的NaOH溶液中即成C.双缩脲试剂是将3～4滴0.01g/mL的CuSO４溶液滴入2mL 0.1g/mL的NaOH溶液中混合而成的D.双缩脲试剂含有两种试剂：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01g/mL的CuSO４溶液 C 5．使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是 ①制组织样液 ②加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液 ③加入0.01g/mlCuSO4溶液④加入0.05g/ml CuSO4 溶液 ⑤煮沸2 分钟 ⑥出现砖红色沉淀 A．①→②→③→⑤→⑥ B．①→（②+③）→⑤→⑥ C．①→②→④→⑤→⑥ D．①→（②+④）→⑤→⑥ D 6．用斐林试剂鉴定还原性糖时，溶液颜色变化过程为A．浅蓝色→棕色→砖红色?????????? B．无色→浅蓝色→棕色 C．砖红色→浅蓝色→棕色?????????? D．棕色→绿色→无色 A 7、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是 A．可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀 B．只有脂肪的鉴定可需要使用显微镜　　　　　　　　 C．用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 D．使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用 A 8.下列哪组试