1.2基因工程的原理及技术.pptVIP

什么叫基因工程？;科技探索之路 ;DNA重组技术的基本工具;;二、 “基因的针线” —— DNA连接酶;作为运载体的必要条件;三、基因的运载工具——运载体;;2．现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。下列相关叙述正确的是;3．下列关于生物工程中常用的几种酶的叙述中，错误的是 A．一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，能用于提取目的基因 B．DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合，能形成重组DNA C．纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁，能用于原生质体的制备和培养 D．胰蛋白酶能使动物组织分散成单个细胞，能用于动物细胞培养;;;练习;2、人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗??基因，该抗性基因的主要作用是 A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B．有利于对目的基因是否导入进行检测 C．增加质粒分子的分子量 D．便于与外源基因连接;第二节 基因工程的原理和技术;阅读课本P5-7页回答以下问题:;一、获取目的基因;目的基因的提取方法：人工合成;2、利用PCR技术扩增目的基因;循环;PCR技术;⑥过程：; 基因组文库的构建 将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因组片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因组文库。;基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中通过克隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因;二、形成重组DNA分子——核心步骤;抗生素抗性基因;三、将重组DNA分子导入受体细胞;1）将目的基因导入植物细胞;2.将目的基因导入动物细胞;1.将目的基因导入植物细胞;四、筛选含有目的基因的受体细胞;从分子水平进行筛选;鉴定——;插入哪一条染色体、插入某一染色体的位置都是随机的，这样可能破坏正常基因的结构和功能，使受体细胞不能完成某项生命活动甚至死亡。 ;糖蛋白是蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网上加工完成的。内质网存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这种细胞器，因此，由大肠杆菌中生产糖蛋白是不可能的。;◆用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是 A．常用相同的限制性内切酶处理的基因 和质粒 B．DNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能 成功表达 ;◆下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥;◆基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的 为模板， 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成 。 (2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、 。 (3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有 种环状DNA分子，它们分别 是 。;◆继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。 （2进行基因转移是，通常要将外源基因转入___________中，原因是_____________。 （3）通常采用_______ 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组 （4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。 (5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的___ __转入________细胞中构成重组细胞，使其