western-blot-教学选编.pptVIP

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  • 2017-04-21 发布于湖北
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western-blot-教学选编

;提问:RT-PCR、WB、免疫组化、 FCM、ELISA、Bio-plex 用来 检测什么? 有何区别?;SDS蛋白分析的利器; Western 既可以定性,又可以半定量,是初步鉴定蛋白质最方便也是最通用的方法。 ; Western Blot又称免疫印迹,是指将蛋白样品转移到固相载体上,而后利用相应的抗体来检测目的蛋白的一种方法。是检测混合样品中单一特定蛋白的常用技术。 ; 研究检测样品中特异性蛋白质的存在 细胞中特异蛋白质的半定量分析 蛋白质分子的相互作用研究 ;;;;材料:HT-29细胞(收集25cm培养瓶一瓶) 试剂:RIPA蛋白抽提试剂 (裂解液有多种,根据需要选择) 检测 beta-actin,分子量43KDa 注意:为防止蛋白酶对蛋白的降解,提前前需加入1x coaktail (含PMSF) ,冰中 操作。 ;Procedure for Lysis of Monolayer-cultured Mammalian Cells Note: If desired, add protease and phosphatase inhibitors to the RIPA Buffer immediately befor

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