背景知識六:菌种保藏技术.pptVIP

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背景知识六:菌种保藏技术;微生物会发生变化吗? 分离得到的微生物可以直接用于生产吗? 怎样保存微生物?;知识节点一 遗传变异的物质基础 知识节点二 原核微生物的基因重组 知识节点三 真核微生物的基因重组 知识节点四 微生物育种技术 知识节点五 菌种保藏技术;知识节点一 遗传变异的物质基础; 一、三个经典实验证实核酸是遗传变异的物质基础 (一)经典转化实验:;2、细菌培养试验 热死S菌 不生长 肺炎双球菌 活R菌 长出R菌 热死S菌+活R菌 长出大量R菌+10-6S菌 ; (二)噬菌体感染实验 ; (三)植物病毒的重建实验 TMV重建实验示意图(箭头表示遗传信息的去向) ; 二、遗传物质在细胞内的存在部位和方式 (一)细胞水平 1 核染色体 2 质粒 (1)致育因子(F因子)又称致育因子或性因子 (2)抗性因子(R因子) 又称R质粒 (3)产细菌素因子 ( 4)诱癌质粒(Ti质粒) (5)巨大质粒(mega质粒) (6)降解性质粒 (二)分子水平 核酸(DNA、RNA);知识节点二 原核微生物的基因重组;一、转化 (一)定义 转化或转化作用: 转化因子:具有转化活性的外来DNA片段 转化子:转化后出现了供体性状的受体细胞 (二)转化微生物的种类 肺炎链球菌、嗜血杆菌属、芽孢杆菌属、奈瑟氏球菌属)、根瘤菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属和黄单胞菌属 ; (三)转化的条件 能进行转化的受体细胞必须处于感受态,同时有外源DNA片段存在,才能实现其转化。 (四)转化过程 ((五)与转染区别);二、转导 完全缺陷噬菌体: 转导噬菌体/转导颗粒 部分缺陷噬菌体: 转导子:获得新遗传性状的受体细胞 ;(一)普遍转导 1 完全普遍转导;2 流产转导 ;(二)局限转导 1. 低频转导 (LFT) ■部分缺陷噬菌体的形成 ■当部分缺陷噬菌体感染宿主细胞并整合在宿主的核基因组上时,可使宿主细胞成为一个局限转导子(而不是一个溶源菌, 对λ噬菌体不具有免疫性)。 ;2. 高频转导 (HFT) 当双重溶源菌被紫外线等诱导时,其中的正常λ噬菌体的基因可补偿λdgal所缺失的部分基因功能,因而两种噬菌体就同时获得复制的机会。 因此由双重溶源菌所产生的裂解物中,含有等量的λ和λdgal粒子,这就称HFT(高频转导)裂解物;(三)普遍性转导和局限性转导的比较; 三、接合 (一)定义 接合:供体菌(“雄”)通过其性菌毛与受体菌(“雌”)相接触,前者传递不同长度的单链DNA给后者,并在后者细胞中进行双链化或进一步与核染色体发生交换、整合,从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象。 接合子:通过接合而获得新性状的受体细胞。;(二)E.coli的四种接合型菌株;(三)几种杂交的结果: 1.F+ 与F-的杂交 杂交的结果:供体菌和受体菌均成为F+细胞 没有供体菌染色体DNA的转移 2. Hfr 与F- 的杂交 杂交后的受体细胞仍然是F- 部分供体菌DNA染色体转移到受体菌中 3. F′与F-杂交 受体细胞也就变成了F′ 部分宿主细胞的DNA随F′因子进入受体菌细胞;(四)原生质体融合 是将遗传性状不同的两种菌融合为一个新细胞的过程 主要包括原生质体的制备、原生质体的融合、原生质体再生和融合子的选择等步骤。;知识节点三 真核微生物的基因重组; 准性生殖和有性生殖的比较;知识节点四 微生物育种;(二)自发突变与育种 1.自然选育 在日常生产过程中,不经过人工处理,利用菌种的自发突变,从而选育出优良菌种的过程 2.定向育种 是指在某一特定条件下,用某一特定因素长期处理某微生物的群体,同时不断地对它们进行移种传代,以积累自发突变,并最终获得优良菌株的过程 ; 二、诱变育种 指用人工的方法处理均匀而分散的微生物细胞群,促使它们发生突变,再从中筛

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