基因敲除动物模型与比较医学_生镅em_自然科学_专业资料.pptVIP

大连医科大学 实验动物中心 比较医学教研室;第一部分 转基因、基因敲除动物技术与比较医学;第一部分 转基因、基因敲除动物技术与比较医学;第三节 基因敲除动物技术;基因敲除概述;基因敲除定义;ａ．ES细胞的获得　 ｂ．基因载体构建 ｃ．将基因打靶载体通过一定的方式(常用电穿孔法)导入同源 的胚胎干细胞(ES cell)中，使外源DNA与胚胎干细胞基因组中相应部分发生同源重组，将打靶载体中的DNA序列整合到内源目标基因组中从而得以使目标基因缺失。 ｄ．用选择性培养基筛选已击中的细胞 　　 ｅ．通过观察嵌和体小鼠的生物学形状的变化进而了解目的基因变化前后对小鼠的生物学形状的改变，达到研究目的基因的目的。在嵌和体小鼠之间交配产生纯合性基因敲除小鼠。;Mansur的正负选择系统;基因同源重组法敲除靶基因的基本步骤;由嵌合体得到基因敲除的纯合体小鼠;条件性基因敲除法：利用Cre／LoxP或FLP/FRT实现靶基因的切除;条件性基因敲除的基因重组及切除步骤;四环素诱导的基因敲除过程示例图;;需要敲除的靶基因转录翻译出活性蛋白;基因捕获法的基本原理图;第四节 基因敲除动物技术在比较医学研究中的应用;1. 遗传病中的应用;2. 心血管病中的应用;3. 肿瘤病等中的应用;4. 人类器官移植中的应用;5. 免疫学中的应用;未来发展方向; 如被敲除的是具有致命功能的基因，则小鼠将在胚胎