淡水发光菌青海弧菌Q―67对环境激素类物质毒性检测应用研究进展.docVIP

PAGE  PAGE 10 淡水发光菌青海弧菌Q―67对环境激素类物质毒性检测应用研究进展 　　摘要：以新型淡水发光菌――青海弧菌 Q67（Vibrio―qinghaiensis s p.-Q67） 为检测生物，以Veritas TM微孔板光度计为发光强度测试设备，建立了测定环境污染物对发光菌发光强度抑制毒性的微板发光测试新方法。指出了随着对淡水发光细菌Q-67研究的不断进行，该菌种逐渐成为国内除了明亮发光杆菌、费氏弧菌以外的毒性检测菌种。 　　关键词：青海弧菌；环境激素；毒性检测 　　中图分类号：X832 　　文献标识码：A文章编号2016 　　1引言 　　随着工业革命的发展，人类开启了环境污染的加速时代[1]，目前人类的生存环境正面临日益严重的污染危机[2～4]。迄今为止，已经有约80000种化学物质存在日常用品以及食物当中，而且每年约新合成化学物质1500种。为了应对不同生物毒理学试验的选择，各个机构制定了不同的方法与标准[5]，现在通过美国EPA统计显示：ICCVAM机构总结出了63种测试方法；这些方法中美国执法机构认可60种；被其他机构采纳41种，欧盟认可并采纳47种[6]。针对水体中各种有毒有害污染物质，普通理化指标已经不能完全满足生态效应评价，与毒理学、医学、环境生态学、分析化学等学科交叉的环境毒理学应运而生[7，8]。现在人们开始从传统物质的毒性研究转移到潜伏期更长的环境激素类物质。 　　大多数环境激素都对动物和人类身体器官、生殖繁殖等有影响，严重时能通过多种途径使身体发生癌变以及婴儿先天畸形等[9]。环境激素一般毒性作用剂量小、潜伏时间长，常作用于神经系统、生殖系统、免疫系统、肝脏肾脏等；表现为对物种健康、生殖繁衍有巨大威胁。Our Stolen Future网站上最新公布的环境激素物质名录近百种。对于环境激素对人体作用研究，国内已经有学者做过一些环境激素毒理性相关研究，但在水体中低浓度环境激素毒性检测研究几乎还是空白。 　　2发光细菌法简介 　　发光细菌法是1978年Beckman仪器公司使用明亮发光杆菌为菌种与生物发光光度计结合的短期、经济、快速的测试方法。发光菌急性毒性检验方法是采用生物发光光度计进行生物毒性检验的毒理学方法之一，与传统毒性检测方法相比具有简便、快速、灵敏等优势，在环境毒理学中对环境污染物风险评价等方面有重要意义。在毒性测试方面应用的发光菌现在主要有：明亮发光杆菌[10]、费氏弧菌[11， 12]、青海弧菌[13～15]。1995年中国就颁布了适用于工业废水、纳污水体及实验室条件下可溶性化学物质的《水质急性毒性的测定发光菌法》（GB/T 15441-1995）国家标准。 　　青海弧菌是1985年中国学者朱文杰等从青海湖产的青海裸鲤体表分离到一种新型淡水发光菌，并命名为青海弧菌，其典型菌株是Q-67[15]。通过国内朱文杰、马梅、刘树深等的努力，建立了使用Q-67能与明亮发光杆菌相提并论的淡水发光菌毒性测试方法[13， 14]。此方法测定污染物质毒性是以Veritas T M微孔板光度计为发光强度测试设备，以有毒物质对发光菌发光强度抑制表征毒性大小的新方法。该法具有应用范围广、灵敏度高、相关性好、反应速度快、自动化程度高、人为错误少等优点；与明亮发光杆菌方法相比，具有无盐度干扰、pH范围广等特点[16]。 　　在水体环境中，物化指标并不能从整体上反映水质的好坏，尤其是对存在低浓度污染物质的水体，而且对于污染物的毒性来说，并不是取决于相关化学参数。普通水质指标已经不能完全满足水质对人体健康风险评价要求。在进行水体快速毒性评价时，选择有代表性的毒性测试方法和测试生物是非常有必要的，现在用的一般毒理性测试方法有：鱼类（斑马鱼）[17]、发光细菌[13]、海藻[18]、黑褐新糠虾[19]、底栖软体动物[20]等。 　　3青海弧菌研究 　　3.1基本研究 　　青海弧菌Q-67发现以来，很多学者对它进行了相关研究，极大地推动了其在相关领域的应用。郑敬民等通过实验探讨了环境因子对青海弧菌生长和发光的影响[21]，发现甘油对生长影响最大，氮对发光影响最大，并提出了比较合理的培养基配方。马梅在论文完成期间对pH值、菌液浓度、反应时间等因素对发光菌Q-67发光强度的影响做了相关研究[16]。刘清等对几种单质金属的联合毒性进行了研究[22]，初步探讨了两种物质之间的拮抗、加和以及协同作用。莫凌云等对5种取代酚化合物对淡水发光菌的联合毒性的研究中，还对单个取代酚化合物毒性进行了测试[23]。 　　3.2应用研究 　　从刘清等1997年利用Cu、Zn、Cd、Hg对青海弧菌（Q67菌株）联合毒性作用的研究开始，青海弧菌逐步应用于毒性