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DNA的生物合成 (复制) DNA Biosynthesis，Replication 第 十 章 复制(replication) 是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 复制的基本规律 Basic Rules of DNA Replication 第一节 复制的方式 ——半保留复制(semi-conservative replication) 复制的高保真性(high fidelity) 双向复制(bidirectional replication) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) 一、半保留复制的实验依据和意义 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 半保留复制的概念 A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 母链DNA 复制过程中形成的复制叉 子代DNA 目 录 子链继承母链遗传信息的几种可能方式 全保留式 半保留式 混合式 密度梯度实验 ——实验结果支持半保留复制的设想。 第一代 第二代 梯度离心结果 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 半保留复制的意义 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 二、双向复制 A. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter) 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 三、复制的半不连续性 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为领头链。 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随从链。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 DNA复制的酶学 The Enzymology of DNA Replication 第二节 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶，简写 为 DNA-pol 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 引物(primer): 提供3-OH末端使dNTP可以依次聚合 其他的酶和蛋白质因子 一、复制的化学反应 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 目 录 聚合反应的特点 DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5 → 3方向进行 。 二、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 活性：1. 53 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性 3  5外切酶活性 5  3外切酶活性 ? 能切除突变的 DNA片段。 能辨认错配的碱基对，并将其水解。 核酸外切酶活性 目 录 （一）原核生物的DNA聚合酶 DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ （一）原核生物的DNA聚合酶 功能：对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补。 DNA-pol Ⅰ （109kD） 323个氨基酸 小片段 5  核酸外切酶