遗传学实验_人群中水杨酸品尝力高低的分析.doc

人群中水杨酸品尝力高低的分析 一、实验目的 通过实验掌握人群中水杨酸品尝力的分析方法，熟悉遗传学群体调查实验的方法并逐步加深对群体遗传学中遗传平衡定律的认识。 二、实验原理 水杨酸（salicylic acid; SA），为白色结晶性粉末，无臭，味先微苦后转辛。在不同人群中对该物质的尝味能力不同。这种尝味能力是由一对等位基因(A.a)所决定其中A对a为不完全显性。基因型为AA，能尝出1/6000000—1/750000的水杨酸的苦味；Aa基因型，能尝出1/480000—1/380000溶液的苦味，基因型为aa，能尝出1/24000以上浓度水杨酸的苦味。极个别体甚至对水杨酸的结晶也尝不出，这类个体在遗传学上称为水杨酸味盲。尝味者为AD，味盲者为AR。水杨酸 尝味能力的调查在研究人类群体遗传学、种族学方面有其科学价值;亦可作为双生子、亲子鉴定的简便易行的方法之一。 将水杨酸配制成各种浓度的溶液，由低浓度到高浓度逐步测试学生的尝味能力，由此可区分出味盲（隐性纯合体）、高度敏感（显性纯合体）和介于二者之间的人（杂合体）。据此可对人群中味盲基因的频率进行分析。 哈迪一温伯格定律也称遗传平衡定律，是由英国数学家哈迪（G.H.Hardy)和德国医生温伯格分别于1908年和1909年各自提出的。 两个等位基因的哈迪一温伯格定律的公式为：(p+q)2=p2+2pq+q2=1。 其中p代表一个等位基因（如A）的频率，q代表另一个等位基因（如a）的频率, p2代表一个等位基因纯合子（如AA）的频率，q2代表另一个等位基因纯合子（如aa）的频率，2pq代表杂合子（如Aa）的频率 。 三、实验材料 水杨酸（salicylic acid; SA）、试剂瓶、一次性塑料吸管。 四、实验步骤 1、溶液的配置 取水杨酸晶体粉末0.65克，加蒸馏水500ml，在室温下溶解，原液浓度1/750，为1号液。取原液100ml，用蒸馏水稀释1倍，为2号液。取2号液100ml，蒸馏水稀释1倍为3号液。以此类推。直到11号液，为1/6000000。尝味能力在1-3之间的为aa型，4-7之间的为Aa型，7-11之间的为AA型。 2、味觉测试 每人按浓度由低到高依次尝味，记录基因型。 ①测试时,让受试者正坐,仰头张口伸舌,用滴管滴1～2滴11 号液于受试者舌根部,让受试者慢慢咽下尝味,然后用蒸馏水做同样的试验。 ???询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道。若不能鉴别或鉴别不准,则依次用10号、9号溶液重复试验,直到能明确鉴别出水杨酸的苦味为止。 ③当受试者鉴别出某一号溶液时,应当用此号溶液重复尝味3 次,3 次结果相同时,才是可靠的,并记录首次尝到水杨酸苦味的浓度等级号。如果受试者直到1号液仍尝不出苦味,则其尝味浓度等级定为 1 号。 ④在测定时,注意用蒸馏水交替给受试者尝味,避免受试者的臆意猜测而影响结果的准确。 五、实验结果及数据处理 根据一个实验班的测定结果，求出基因A、a的频率，并应用X2检验去确定实验班这个群体是否为平衡群体。 基因频率的计算方法：通过获得的不同基因型的数目或基因型频率求得。 基因频率=群体中某个座位的特定等位基因的拷贝数 / 群体中该座位所有等位基因数 p=f（A）=（2×AA+Aa）/（2×N），（N为个体总数） q=f（a）=（2×aa+Aa）/（2×N） 两个等位基因的频率，f(A)和f(a)一般以p和q来表示。一个座位上的基因频率相加总是等于1，因此一旦计算出了q，那么p=1-q。 1、实验结果 实验结果数据统计 基因型AAAaaa人数 2、实验数据处理 基因频率的计算： 对所测得的数据，根据哈代温伯格定律： A基因频率：p a基因频率：q 平衡群体基因型频率的计算 按哈代温伯格定律公式：p2+2pq+q2=1,得： AA: p^2 Aa: 2pq aa:q^2 卡方（χ2）检验 假设我们所在班级的群体是一个遗传平衡群体，检测各基因型的理论预期值与实际测得值之间的吻合程度进行验证。可用χ2 检验。如下： PTC尝味能力的χ2检验 AAAaaa总计实际频(O)理论频(C)(Np2) (N2pq) (Nq2) N (O-C)2/C 分析：由于群体数较小，班级成员来源不同，且由于各个地点基因频率有差别，因此会对结果造成影响。 实验时，应注意，由于提前知道检测目的，可能造成心理暗示作用，应用清水作为对照。