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专题九 现代生物科技专题;(一)概念:
基因工程是在 水平上进行的设计和施工,因此又叫做
(二)基因工程的基本工具包括:
。;1、限制酶
(1)作用:能够识别双链DNA分子的的某种 序列,并且使每一条链中 的两个核苷酸之间的
断开。
EcoRI限制酶识别的列: 。
SmaI限制酶识别的序列: 。
一种限制酶只能识别 种核苷酸序列。
(2)作用结果:产生 或 。;2、DNA连接酶
(1)作用部位: 。
(2)根据酶的来源不同,可将这些酶分为两类:
① 连接酶
来源: 。
作用:只能“缝合”具有 的双链DNA片段。
② 连接酶
来源: 。
作用:既可以连接 ,又可以连接 。
3、运载体
常用的运载体有: 等。;(三)基因工程的基本操作程序步骤:
;
;
;
。
1、获取目的基因的方法
(1)未知基因的核苷酸序列时:
可从 中获取目的基因。
(2)已知基因的核苷酸序列时:
利用 扩增目的基因和
利用 直接人工合成目的基因。;(3)条件: 、
、 、
_ _等。;2、基因表达载体的构建
(基因工程的 )
①用一定的 切割
质粒,使其露出 。
②用 切断目的
基因,使其产生 。
③将切下的目的基因片段
插入质粒的切口处,
再加入适量 ,
形成了一个重组DNA分子。
④一个基因表达载体的组成,
除了目的基因外,还必须
有 、 以及 等。;3、将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入植物细胞的方法:
。
将目的基因导入动物细胞的方法:
。
将目的基因导入微生物细胞的方法:
。;4、目的基因的检测与鉴定
(1)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因(目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。)
方法: 。
(2)检测目的基因是否转录出了mRNA(检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。)
方法: 。
(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质
方法: 。;(一)植物组织培养技术
1、原理: 。
2、过程:;(二)植物体细胞杂交技术
1、过程:
(1)制备原生质体:用 酶和 酶去除细胞壁,获得具有活力的 。
(2)诱导原生质体间的融合
诱导方法:
物理法(包括 、 、 等)
化学法(用 ( )诱导)
(3)获得杂种细胞,在进行组织培养
2、意义:克服不同生物 的障碍。;(三)植物细胞工程的实际应用
1、作物脱毒
(1)材料:植物的 (如茎尖)
(2)常用方法: 。
2、人工种子
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