1、基因工程和主要研究内容.pptVIP

基因工程;§1基因工程及其主要的研究内容; 1.1.2基因工程诞生的技术基础 1、DNA分子的体外切割技术； 2、DNA分子的核苷酸序列分析技术； 3、琼脂糖凝胶电泳技术和Southern印迹转移 杂交技术 1.1. 3个对基因工程的诞生具有重要意义的发现 1、DNA连接酶（1967、1970）和核酸限制性内切 酶（1972）的发现； 2、基因克隆载体：质粒和噬菌体； 3、大肠杆菌转化难题的解决;1.1.4 基因工程的诞生 1、1972年，斯坦福大学的P.Berg小组第一次成功完成了DNA的体外重组： SV40(EcoR1切）+ λ 噬菌体(EcoR1切）+DNA连接酶 2、1973年，斯坦福大学的S.Cohen等人第一次成功完成了基因克隆实验： R6-5(kanr)+pSC101(Tetr)+ EcoR1→+DNA ligase →重组DNA分子→转化E.coli → E.coli (Tetr 、kanr);;;;1.4 基本概念及主要的研究内容 1.4.1 基本概念 1、基因工程：在体外将核酸分子插入人工改造构建的病毒、质粒 或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主或受体细胞内，而能持续稳定地繁殖。 2、遗传工程：以改变生物体性状特征为目标的遗传信息量的操作，它既包括了常规的选择育种，也包括了相对复杂的基因克隆等不同的技术层次。 3、克隆：从一个共同祖先无性繁殖下来的一群遗传上同一的 DNA分子、细胞或个体所组成的特殊的生命群体或得到这些特殊生命群体的实验操作过程。 ; 4、基因克隆或DNA分子克隆：利用微生物制备大量纯一的特定DNA片段的过程。 5、重组DNA技术：将不同来源的DNA分子通过酶切、连接的方法重新组合在一起的技术。 1.4.2 主要的研究内容或步骤 1、从生物体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离带有目的基因的DNA片段； 2、在体外，将带有目的基因的外源DNA片断连接到能够自我复制的并具有选择标记的载体分子上，形成重组DNA分子；;;;; 2、生物防护标准（针对大肠杆菌）： （1）EK1级：符合该标准的大肠杆菌菌株一般都要死亡的； （2）EK2~3级：符合该标准的大肠杆菌菌株在自然环境中则是无法存活的。;