胚胎复习.doc

胚胎分割（Embryo bisection）：通过对胚胎进行显微操作，将一枚胚胎用显微手术等方法分割成二分、四分甚至八分胚，经体内或体外培养，然后移植入同期发情受体母畜中，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。 理论依据: 早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性。 全能性（totipotenty）指细胞能参与包括生殖腺在内的各种组织的发育潜力，即发育成完整动物体的能力。 体细胞重编程(somatic reprogramming)：是分化的体细胞在特定的条件下被逆转后恢复到全能性状态，或者形成胚胎干细胞系，或者进一步发育成一个新的个体的过程。 胚胎分割方法：(一) 毛细管吹吸法：1.透明带切口或除去2.卵裂球二分3.半胚注入到空透明带中4. 琼脂二次包埋5.分离胚的体内培养6.从中间受体输卵管回收胚胎7.胚胎移植入受体子宫角中(二) 显微手术法1除去透明带（也可直接切割）2切割3注入空透明带4移植(三) 徒手分割法(桑椹胚和囊胚)体视显微镜、保险刀片。先用0.1%－0.2%链霉蛋白酶软化透明带，在实体显微镜下，用自制切割针直接等分切割胚胎，为防止切割时胚胎滚动，可将胚胎置于微滴中进行分割，分开后及时加入液体。培养皿底部刻几条直线 胚胎分割技术的应用：1、胚细胞核移植 2、构建异源重构胚胎3、研究遗传--环境相互作用 4、生产嵌合体 5、产前诊断 6、提高体外受精的妊娠率 体外受精（IVF）：指用经特殊处理的精子在体外使卵母细胞受精的技术。通常所指的体外受精技术，是将哺乳动物的精子和卵子置于适宜的体外培养条件下使之完成受精的一种技术。 试管动物技术即胚胎体外生产技术，是相对于体内胚胎而言的,是指卵母细胞在体外成熟后与获能的精子体外受精并分裂发育到桑椹胚或囊胚期(5-7天)的技术。包括卵母细胞体外成熟（in vitro maturation，IVM）、体外受精（in vitro fertilization，IVF）、精子的体外获能和体外培养（in vitro culture，IVC），体外生产的胚胎简称IVF胚胎。体外受精技术又包含卵母细胞的体外成熟培养、精子的体外获能、体外受精、受精卵的体外培养等多项密切相关的技术。 体外受精的意义：1.体外受精技术的发展为体外工厂化大量生产质优价廉的胚胎提供了可能。2.体外受精技术人类生殖医学（如试管婴儿治疗不孕不育症等）产生了的深远的影响。3.体外受精技术能为动物克隆、胚胎性别鉴定和转基因等其他胚胎生物技术提供丰富的实验材料和必要的研究手段。4. 体外受精技术有利于揭示雌、雄配子在成熟、获能过程中的形态、生理变化及受精机理与早期胚胎的发育本质5. 体外受精技术在拯救濒危动物和开发利用珍稀动物等方面也具有重要的意义。 胚胎体外培养的发育阻断:随着胚胎的发育，合子的基因开始启动转录，其代谢活动逐步由母源的mRNA控制向合子本身的mRNA控制过渡，在这一过渡时期，胚胎对所处的环境条件特别敏感，稍有不适便表现出不可逆的发育阻断。（门槛）在进行哺乳动物胚胎体外培养时，若胚胎所处的条件不当，就会出现体外发育阻断，即早期胚胎停顿在某个特定时期，甚至不能发育，发育阻断的出现时间与合子基因启动的时间有关。与体细胞共培养是促使胚胎通过发育阻断最为有效的途径 显微受精:是借助显微操作仪，将精子或精子细胞直接注入卵母细胞质中（胞质内受精ICSI） 或卵周隙中（带下受精SUZI）来实现受精的过程（单精显微注射技术） 显微受精的意义：提高珍贵品种精子的利用率;推动精子分离技术的推广应用;提高IVM卵母细胞的受精率;治疗男性不育;转基因（精子作载体） 试管婴儿在专业文献中称为体外受精和胚胎移植(简称IVF)第一代体外受精;第二代胞质内精子注射;第三代着床前胚胎检测;第四代胞浆置换（现在在中国已被禁止） 胚胎移植（embryo transfer, ET）是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出（或通过体外受精及及其他方式得到体外生产的胚胎），移植到另一头同种且生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体的过程。实际上是由产生良种胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代的技术。 理论基础：着床前早期胚胎的游离状态；不同个体（物种）早期胚胎发育内环境相似；不会发生免疫排斥 胚胎移植的意义：1.充分发挥优良母畜的繁殖潜力，扩大良种畜群；2、加速育种进程, 获得更多具有高产性能的半同胞和全同胞，在较短的时间内达到后裔测定所要求后代的数量3、简化良种引进方法4、保存品种资源5、诱发单胎动物产双胎6、研究手段, 是胚胎工程的最后一道“工序”。因此，可以说它是胚胎工程技术的基础。 生理学基础：1卵母细胞的发育潜力, 雌性哺乳动物的生殖细胞在胎儿发育的后期会急剧增加，形成大量的能生成卵子的卵母细胞资源库。2．早期胚胎的游