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Research Paper 研究报告 微生物学报 Acta Microbiologica Sinica 51?2? ?249 － 255? 4 February 2011 ISSN 0001 － 6209? CN 11 － 1995 / Q http? / / journals. im. ac. cn / actamicrocn 一株反硝化光合细菌的生物学特性及系统发育分析 陈慧，张德民 * ，王龙刚，潘志崇 宁波大学，应用海洋生物技术教育部重点实验室，宁波 315211 摘要?【目的】养殖水体中亚硝酸盐的过量积累会对养殖生物产生毒害作用，应用脱氮细菌去除亚硝酸盐是 养殖水质调控的重要手段之一，本文意在得到一株高效去除亚硝酸盐的光合细菌。【方法】采用软琼脂稀释 法分离纯化光合细菌菌株，通过电镜观察、生理生化试验研究其生物学特性、依据 16S rDNA 和光合反应中 心 M 亚基基因? Gene coding for photosynthetic reaction center subunit M，pufM? 序列对其做系统发育分析。【结 果】从淡水养殖塘中分离筛选到一株高效还原亚硝氮的光合细菌菌株 wps。该菌株为革兰氏阴性菌，细胞杆 状，大小为 0. 4 － 0. 6 μm × 1. 5 － 4. 0 μm，极生丛生鞭毛，片层状光合内膜，兼性厌氧光照条件生长，单菌落及 液体培养物呈红色，含细菌叶绿素 a 和类胡萝卜素。最适生长 pH 范围为 5. 5 － 8. 5，最适生长盐度范围为 0 － 2% ，最适生长温度范围为 25℃ － 38℃ 。菌株 wps 与 Rhodopseudomonas palustris 的 16S rDNA 序列相似性 为 98. 9% ，光合反应中心 M 亚基基因序列的相似性为 94. 9% ，但是二者在生物学性质上有较大差异，如菌 株 wps 在 pH5. 5 生长，不能光自养生长，不利用柠檬酸盐、甲酸盐进行光异养生长，需盐酸硫胺素和泛酸钙 做生长因子等。【结论】菌株 wps 可能为 Rhodopseudomonas 属的一个新种，且在养殖水体水质调控中具有重 要应用前景。 关键词? 光合细菌，红假单胞菌，亚硝酸盐，反硝化 中图分类号? Q939 文献标识码?A 文章编号?0001-6209 ?2011? 02-0249-07 养殖水体的生态调控是水产??殖领域关注和研 亚硝酸盐的消除途径主要有两个，一是在亚硝 究的重点之一。随着高密度养殖技术的推广，养殖 酸盐氧化菌的作用下转变成对养殖动物无毒的硝态 水质的控制成为养殖成功的一个关键问题。而养殖 氮，另一个途径就是经反硝化细菌的作用，转变成氮 ［ ］ 水质恶化的指标之一就是养殖废水中存在较高的三 气进入大 气 6 。由 于 亚 硝 酸 盐 氧 化 菌 属 于 化 能 自 态氮，尤其是亚硝态氮浓度过高。亚硝酸盐的过量 养细菌，分离培养及规模化培养都非常困难，因此， 积累对养殖生物产生毒害作用，高浓度亚硝酸盐可 人们更加关注反硝化细菌的作用。反硝化细菌的种 ［ ］ 致鱼虾等死亡 1 － 4 ，低浓度亚硝酸盐影响鱼类的血 类非常多，如光合细菌、产芽孢细菌、假单胞菌、盐单 ［ ，］