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6实验六平板菌落分离法放线菌的插片培养和菌种保藏简介
实验六 平板菌落分离法、放线菌的插片培养和菌种保藏简介
内容:1、细黄链霉菌的平板划线分离;2、细黄链霉菌的插片培养;3、菌种保藏技术简介;4、台式发酵罐简介;5、支管三角瓶的包扎和灭菌;6、分装液体培养基,2组1瓶,100ml/瓶;7下周实验12点30分开始,切记!
细黄链霉菌的平板划线分离和插片培养
细黄链霉菌斜面菌种
彻底融化高氏1号培养基,冷却至50—55℃
无菌操作倒平板(每皿15ml,每人倒4块正常厚度平板+一块略厚平板,用来插片)
冷凝彻底
分区(ABCD)
平板划线 无菌操作取菌,先划A区;
环灼烧后划B区-C区-D区,杀残菌。(插片A区要大,斜插无菌盖片)
皿盖上标明组号,姓名和日期
28℃倒置培养7天
观察结果 无杂菌污染;没划破平板;A区菌苔,B到D区,菌落逐渐稀疏,
D区出现大量的单菌落;D区和A区平行;线条致密,流畅。
菌种保藏
低???,缺乏水(干燥),缺乏氧气和缺乏养料。
传代保种法:斜面或者寄主体内传代;
低温法:4℃,斜面法;半固体穿刺法;隔绝空气(如加石蜡油)更好;
-20—80℃,菌悬液加防冻剂(甘油法或者DMSO);
液氮,菌悬液+防冻剂;
常温下干燥:如砂土管法,明胶片法;保存也往往放在4℃;
低温下干燥,冷冻真空干燥法;保存于4℃。
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