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实验八动物组织DNA的提取
动物组织中总DNA的提取;实验目的;高等动物、植物的基因组相当宠大, 如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成,包含了该物种生长,发育,繁殖等各项生理活动的几乎全部信息量,获得纯度高、基因组相对完整的基因组是以后PCR分析,基因文库的构建,基因探测等的研究的基础。
动物细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。;DNA提取原则;实验原理; SDS(十二烷基硫酸钠 )是阴离子表面活性剂,溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA 抑制DNA酶的活性。再加入氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于双蒸水或TE溶液中,即DNA溶液。;试剂;SDS抽提液配方(1000ml):;操作步骤;结果分析与讨论
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