改造中国仓鼠卵巢细胞_来大志.pdf

18 卷 4 期 生 　物 　工 　程 　学 　报 Vol .18 　No .4 2002 年 7 月 Chinese J ournal of Biotechnology July 　2002 改造中国仓鼠卵巢细胞 　 来大志 　齐连权 　于长明 　王海涛 　陈 　薇 ＊ (北京微生物流行病研究所 , 北京 　100071) 摘　要 　与原 核细胞 、酵母细胞以及昆虫细胞 相比 , 中国仓 鼠卵巢 细胞(CHO)作为 宿主细胞 表达的 外源蛋 白最接 近其天然构象 , 因而 CHO 细胞表达系统 是生物 工程制 药最为 理想的 表达系 统 。 但这种 系统也 存在诸 多缺点 。 如 在大规模培养中 CHO 细胞会面临着对无血清 培养基 的适应性 差 、细胞无 限度增 殖以及 细胞凋亡 等很多 难题 。 所 以除 了在培养基 、培养条件和表达载体方面下功夫优化该 系统外 , 对 CHO 细胞本身进行改造已成为优 化 CHO 表达 系统的另一热点 。 关键词 　CHO 细胞 , 改造 , 大规模培养 , 细胞凋亡 , 细胞黏附 , 细胞周期 中图分类号 　Q813 　　文献标识码 　C 　　文章编号 1000-3061(2002)04-0415-05 　　中国仓鼠卵巢 细胞(CHO)是 目前 最成功 的生 物制 品表 绍 。 达宿主细胞[ 1] 。 工业化规模生 产生物制品 需要对 CHO 细胞 1　改造 CHO 细胞 , 促进其贴壁性 进行大规模培养 。 有血清培养基由于受成本昂贵 , 批次 间存 在差异 , 有污染病毒等有害物质的可能以及供应渠道不 畅等 CHO 细 胞是兼 性贴 壁细 胞 。 既 可以 贴 壁生 长 , 也 可以 多种因素的限制 , 加之血清的存在会给下游纯化工作带 来困 悬浮生长 。SFM 或 PFM 中培养 的 CHO 细胞 , 由 于无黏 附因 难 , 使有血清培养基在 工业规 模的细 胞培养 中 , 已 让位 于无 子的存在 , 细胞 往往以悬浮 方式生 长 。 若加 入黏 附因子 , 如 血清培养基(Serum-free medium , SFM)或无 蛋 白培 养基(Pro- 纤粘连 蛋白(Fibronectin)、层粘 连 蛋 白(Laminin)、胶 原(Col- tein-free medium , PFM)。 由于 没有 血 清提 供生 长 刺激 因子 、 legen)、玻表 粘连 蛋 白(Vitronectin)等 可以 使细 胞 重新 贴 壁 。 黏附因子 、扩展因子以 及其它 细胞生 长存活 的必需 成分 , 用 在大规模细胞培养中 , 尽管 有时应 用悬浮 培养方