第十一单元第45讲.docVIP

第45讲　生物技术在其他方面的应用 [考纲要求]　1.植物的组织培养。2.PCR技术的基本操作和应用。3.蛋白质的提取和分离。4.从生物材料中提取某些特定的成分。5.实验：DNA的粗提取与鉴定。 考点一　植物组织培养 1． 植物组织培养的过程 外植体eq \o(――→,\s\up7(脱分化))愈伤组织eq \o(――→,\s\up7(再分化))幼苗―→移栽 植物组织培养常用的培养基是MS培养基，一般需要添加生长素和细胞分裂素两种植物激素。 2． 植物组织培养的实验操作 (1)菊花的组织培养过程 制备MS培养基(配制母液、配制培养基、灭菌)→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。 (2)月季的花药培养过程 ①过程：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→鉴定和筛选。 ②影响花药培养的因素主要有材料的选择和培养基的组成。 ③要挑选完全未开放的花蕾，确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。 3． 影响植物组织培养的因素 (1)菊花的组织培养，一般选择开花植株的茎上部新萌生的侧枝 (　×　) (2)植物激素的浓度可影响细胞分化，但使用的先后顺序及比例不影响组织培养的过程 (　×　) (3)pH、温度和光照等也影响植物组织培养 (　√　) 易错警示　实验操作中易错的几个问题 (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季的花药培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照；而在后期均需光照。 1． 植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回答相关问题： (1)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。一般来说，在____________期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择____________的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有____________法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用____________法，该法能将花粉细胞核染成____________色。 (2)若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的____________作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的____________和____________过程。 (3)进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加____________、____________等植物激素。欲有利于根的分化，植物激素的用量比例应为________________________________________________________________________。 (4)不同植物的组织培养除需营养和激素外，____________________________等外界条件也很重要。 (5)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是____________，采用灼烧方法进行灭菌的是____________。(填序号) ①培养皿　②培养基　③实验操作的双手　④三角锥形瓶⑤接种环　⑥花蕾 答案　(1)单核靠边　完全未开放　醋酸洋红　焙花青—铬矾　蓝黑　(2)茎尖分生组织　脱分化(或去分化)　再分化(3)生长素　细胞分裂素(两空顺序可以颠倒)　生长素多于细胞分裂素　(4)pH、温度和光照　(5)③⑥　⑤ 解析　(1)早期的花药比后期的更容易培养成功。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。该时期的花药通常存在于完全未开放的花蕾中。(2)根尖、茎尖约0～0.1 mm区域中几乎不含病毒。病毒通过维管系统移动，而分生组织中不存在维管系统，且茎尖分生组织中，代谢活力高，竞争中病毒复制处于劣势。(3)生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化。当生长素含量多于细胞分裂素含量时，利于生根。(4)植物培养时，除需要营养、激素外，还需要适宜的温度、pH和光照等。(5)对实验器具进行灭菌处理，对实验过程中的具有生物活性的材料或用具进行消毒处理。 1． 植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同 　　 项目 内容　　菊花的组织培养月季的花药培养理论依据植物细胞的全能性基本过程脱分化→再分化外植体的细胞类型体细胞生殖细胞操作流程制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育影响因素选材、营养、植物激素、pH、温度、阳光等培养结果正常植株单倍体植株生殖方式无性生殖有性生