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选修3第1讲基因工程[教材专题1]
选修三;一、DNA重组技术的基本工具
1.DNA重组技术的“分子手术刀”
(1)“分子手术刀”即 。
(2)来源:主要从 中分离。
(3)功能:识别 、切割 。
(4)结果:产生 或 。;2.E·coli DNA连接酶与T4DNA连接酶
(1)化学本质: 。
(2)功能上的相同点:均可催化形成 。
(3)功能不同点: 可“缝合”黏性末端和
平末端, 则只能缝合“黏性末
端”,不能缝合平末端。;3.基因工程常用的载体
基因工程常用载体是 ,其化学本质是
。
二、基因工程的基本操作程序
1.获取目的基因的手段
①从 中获取;
②利用PCR技术扩增目的基因;
③通过DNA合成仪用化学方法直接合成。;2.基因工程的核心
(1) 是基因工程的第二步,也是基
因工程的核心。
(2)基因表达载体的组成:除目的基因外,还必须有
、 和 等。
①启动子:是一段有特殊结构的 ,位于
,是 的部位。
②标记基因的作用:鉴定受体细胞中是否含有
,从而 。;3.将目的基因导入受体细胞的方法
(1)植物最常用: 法,其次为 法、
法。
(2)动物:最常用 法,其受体细胞通常为 。
(3)细菌: 法,需用 处理细胞。;4.目的基因的检测和鉴定
(1)首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。
(2)其次还要检测 。
(3)最后检测 。
(4)有时还需进行 。;三、基因工程的应用与蛋白质工程
1.基因工程的应用;技术名称;2.蛋白质工程
(1)蛋白质工程的目标是:根据
,对 进行分子??计。
(2)蛋白质工程的手段:
对蛋白质的结构进行设计改造,最终必须通过 来完成。;考点一;[做一题]
[例1] (2011·上海高考)回答下列有关基因工程的问题。
(1)基因工程中使用的限制酶,其特点是____________。
(2)下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。;①将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有________。(可多选)
A.X-1 B.X-2
C.X-3 D.X-4
②若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌,然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有________、________。;③如果X-1用E1酶切,产生850对碱基和3 550对碱基两种片段,那么质粒X-2(Tcr基因的长度为1 200对碱基)用E2酶切后的片段长度为________对碱基。
④若将外源的Tcr基因两端用E2切开,再与用E2
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