常用试剂的配制说课.doc

常用溶液的配制 信息来源：生物谷　更新时间：2004-12-21 1:33:00 一、常规溶液 (一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS) 甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4 ?????????????????? 9.465g 蒸馏水????????? ??????????加至1000ml 乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液 KH2P04???????????????????? 9.07g 蒸馏水??????????????????? 加至1000m1 分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH? 甲液ml? 乙液mI??? pH? 甲液ml? 乙液mI??? 5.29 ??? 5.59 ??? 5.91 ??? 6.24 ??? 6.47 ??? 6.64??? 2.5 ??? 5.0 ??? 10.0 ??? 20.0 ??? 30.0 ??? 40.0??? 97.5 ??? 95.0 ??? 90.0 ??? 80.0 ??? 70.0 ??? 60.0??? 6.81 ??? 6.98 ??? 7.17 ??? 7.38 ??? 7.73 ??? 8.04??? 50.0 ??? 60.0 ??? 70.0 ??? 80.0 ??? 90.0 ??? 95.0??? 50.0 ??? 40.0 ??? 30.0 ??? 20.0 ??? 10.0 ??? 5.0? ??? (二)0.3％台盼兰染液 ??? 称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。 ??? (三)0.5％酚红指示剂 ??? 酚红????????????????????? 0.5g 0.1N(0.4％)NaOH?????????? 15ml ??? 双蒸水??????????????????? 85ml ??? 将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。 ??? (四)5.6％NaHCO3溶液 ??? 称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存) ??? (五)10μg／ml秋水仙素 ??? 秋水仙素??????????????????? lOmg 生理盐水??????????????????? 100ml 装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。 ??? (六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液 ??? 将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。 ??? (七)2％柠檬酸钠 ??? 称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。 ?? （八）0.2％次甲基兰染液 ??? 称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。 ??? (九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液 ??? 洋红??????????????????? lg ??? 醋酸??????????????????? 90ml ??? 蒸馏水??????????? ??????110ml ??? 将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。 ??? (十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue) ??? 称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。 ??? (十一)1/3000中性红染液 ??? 取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。 ??? (十二)Giemsa染液 ??? 1．贮备液 Giemsa粉??????????????????? 1g ??????? 纯甘油?????????????????????? 66ml ??????? 甲醇???????????????????????? 66ml ??? 先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。 ??? 2．工作液 ??? 临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。 ??? (十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液 ??