妥布霉素化学提取精制特性研究.PDF

中　国　药　科　大　学　学　 报 304 Journa l of China Pharmaceutical University　 2000, 31( 4): 304～ 308 妥布霉素化学提取精制特性研究 洪文荣　郭养浩　石贤爱　孟　春　陈生裕 1　柳燕燕 1 (福州大学生物工程系 , 福州 350002; 福1 州福益制药有限公司 , 福州 350002) 摘　要　对硫酸妥布霉素生产中发酵液 的水解、离子交换层离、成盐等条件进行了研究。结果表明: 6-O-氨 甲酰妥布霉素水解形成妥布霉素的反应为一 级反应 ,其水解介质最佳 p H值为 10。 用氨 水作为离子交换层 离妥 布霉素解吸剂的最佳浓度为 0. 1 mol /L。 妥布霉素碱转盐应采用高限量计算的硫酸。 按上 述条件生产的硫酸妥 布霉素产品附合 U SP标准。 关键词　妥布霉素 ; 提取精制 ; 水解动力学 ; 抗生素 ; 暗 霉素 　　妥布霉素属氨基糖苷类抗生素 ,在低浓度下能 纯 ; 氨水 (液氨加无离子水 ); 110号弱酸性阳离子交 + 抑杀革兰氏阴性菌 ,对绿脓杆 菌有很强的抑制作 换树脂 N H4 型 (南开大学化工厂生产 )。 用 ,比其它氨基糖苷类抗生素强 2～ 8倍 [1 ] ,被称为 1. 2　测定方法 第二代氨基糖苷类抗生素。 黑暗链霉菌经深层发 成 品 效 价 测 定 采 用 生 物 法 [ 3] ; 中 间 体 采 用 酵 ,能产生很多组分 [2 ] ,但主要为阿泊拉霉素 , 6- HPLC法 [1 ]测定。 未转化率 = 未水解 V′浓度 /水解 O-氨 甲酰 卡那 霉素 B和 6-O-氨甲 酰妥 布霉 素 前 V′浓度。 ( NebramycinV′,以下 简称 V′) ,后 两者经水 解分 1. 3　原理与方法 别生成卡那霉素 B和妥布霉素。 由于发酵产生的 1. 3. 1　 6-O-氨甲酰妥布霉素水解动力学研究 [ 4] 这三个主要成分理化性质相近 ,特别是卡那霉素 B 　分别取 30 mg /ml 6-O-氨甲酰妥布霉素 5 L于 和妥布霉素 ,结构仅差一个羟基 [2 ] , 所以其化学提 10 L不锈钢锅中 ,用氢氧化钠依次调 pH到 9. 0, 取精制比其它氨基糖苷类抗生素复杂 ,制备纯妥布 10. 0, 11. 0; 同时升温到 100℃ ,然后保持恒温。 随 霉素相当困难 ,导致提取制备过程工艺波动大 ,周 后每隔 30 min取样测定妥布霉素的生成量和透光 期长 ,原因难找 ,生产难以稳定。因此我们对妥布霉 度。 水解过程补加水以保持体积不变。 测量不同 素提取精制中的特性进行研究 ,探讨其水解反应动 pH、不同时间的水解程度 ,结果见表 1,为方便起见 力学 ;特定条件下离子交换分离妥布霉素的 pH选 用未转化率表示。 择依据及其重要性以及妥布霉素转盐的特性和合 6-O-氨甲酰妥布霉素水解属稀溶液水解过程 理转盐法。 这些特性研究尚未见文献报道。 ( C19 H38 N6 O10+ H2 O→ C18 H37 N5 O9+ CO2↑+ N H3