分子生物学课件第14章.pptVIP

分 子 生 物 学 实 验;;分子生物学实验综合规程;;每位同学负责自己实验台面和柜体的卫生，值日生负责公用实验台、地面等处卫生； 每次轮到打扫卫生的小组，要认真做好值日工作，离开实验室须向教师声明； 同学与老师之间、同学与同学之间、实验班与实验班之间一定要互相协作配合保持公用房间卫生，注意门窗水电的安全。 遵守通用的实验室规则。 违反上述任何一条规则责任自负，并要扣分，造成损失要照价赔偿。;实 验 成 绩 实验技能 20分 实验报告 20分 实验态度 15分 实验室常识 15分 实验实施 30分;分子生物学实验教程 自编 分子生物学实验指导 魏群 高等教育出版社 分子生物学实验指导 刘进元 清华大学出版社 ;实 验 内 容;;样品、试剂和材料等的保存;;恒温培养箱;恒温空气摇床;灭菌器;PCR 仪;恒温水浴及微量加热器;电 泳 仪;??泳槽;凝胶成像系统;;台式高速冷冻离心机;落地式高速冷冻离心机 ;分光光度计;超净工作台;电子天平;精确的pH值测定;液体试剂的精确取量;制冰机;;3.1 实验规范训练－仪器的操作;3.2 实验规范训练－量程的选择;量程的选择－移液器;3.3 实验规范训练－标签;3.4 实验规范－实验操作;;4 实验准备 4.1 清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等 4.1 洗涤本学期实验用玻璃器皿 4.3 配制试剂 1） 0.1 mol/L CaCl2 100 mL 2） 5 mol/L NaOH 100 mL 胶塞 3） LB液体培养基 100 mL 胰蛋白胨（typtone) 1g 酵母提取物（yeast extract) 0.5g NaCl 1g 加部分水溶解后加20μL 5 mol/L NaOH，定容到100 mL;4） 10%(w/v)SDS储液 50 mL ，室温保存 5） 1 mol/L Tris 200 mL 6） 2 mol/L HCL 100 mL 7） 0.5 mol/L EDTA 100 mL 80 mL水中加18.61g EDTA-Na2H2O，用NaOH调 pH 8（约需2g NaOH），后定容至100 mL 8） 5xTAE 1000 mL 9） 70%乙醇 500 mL 10） Amp ：100 mg/ mL 20ml，分装每管 1 mL，－200C保存;4.4 高温灭菌 LB液体培养基 1.5mL离心管 2瓶/组 枪头/1组 ： 1mL 1盒，200uL 1盒 培养皿 12套/组 无菌水 100 mL /班 0.1 mol/L CaCl2