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半抗原免疫分析[全面]
半抗原免疫分析ABC;内容;*;*;*;*;共同抗原与交叉反应;*;;*; 抗体 antibody,Ab;一、基本概念;二、免疫球蛋白的分子结构;;;2.分类、分型:
(1)根据重链氨基酸组成、序列及结构的差异,将Ig 分为五类:
IgM (μ) 、IgG(γ)、IgA(α)、IgD(δ)、 IgE(ε)
亚类:IgG:IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
IgA:IgA1, IgA2
IgM: IgM1, IgM2
(2)分两型:
根据轻链氨基酸组成、序列及结构的差异,可将轻
链分为两型:κ和λ型
每一Ig单体分子两条重链必须同类,两条轻链必须
同型。
;;;;3.基因工程抗体(GeAb):
第三代抗体
由基因重组技术制备的抗体,称为基因工程抗体。
嵌合抗体 (chimeric Ab)
人源抗体(humanized Ab)
双特异性抗体(bispecific Ab)
Fab/ScFV(single chain
FV fragment)
单域抗体(single chain Ab) ;抗体的结构与功能的关系,
所展现出的生物学功能是其结构的完美表演者。;免疫分析技术;常用的免疫标记物质;*;*;;(一) ELISA技术的原理;;夹心法
Sandwich;竞争法;(二) ELISA所用试剂材料;1、固定相;*;3、最常用的底物;4、缓冲液;酶标仪;酶标仪;(三) 免疫分析方法建立——苏丹红为例;Step 1: Hapten and conjugate;Step 2: characterization of conjugate;Step 3: chessboard tiatrion and calibration curve;Step 4: optimization—nonessential ;例1、标记抗原浓度对检测的影响;例,pH影响;Step 5: sample analysis;Step 6: validation;一个难点:基质效应;基质效应;例1:环境水样的基质效应;(2)基质干扰的消除
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