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  • 2017-04-21 发布于北京
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w-03-细胞生物学研究方法

第三章 细胞生物学研究方法 一、细胞形态结构观察 (一)光学显微镜: 1、普通光镜的性能指标:放大率(放大倍数)分辨力、清晰度、焦点深度、镜象亮度。 分辨力(分辨率、分辨本领):能分辨两个物点之间最短距离的能力,通常是以分辨距离来表示的,即分辨距离越小则分辨力越高。 ;图2-1 尼康E-600 显微镜 ; 人肉眼分辨力测试是规定在明视距离25cm所分辨的最短间距来表示,正常人肉眼分辨力的极限值是0.1mm(毫米),显微镜的分辨力可按下列公式来计算 R=0.61λ/N.A (R 是分辨距离,0.61是常数, λ是照明光波波长,N·A是显微镜物镜的镜口率——光学性能指标,每个物镜上都标有其镜口率的数值)。 ; ∵分辨距离R与镜口率N·A 成反比, ∴若把最大镜口率1.25(即油镜镜口率)代入公式,可以最小分辨距离≌/2由于可见光中最短波长(紫光)为0.4um(即400nm)。 ∴普通光镜最大分辨力的理论极限为0.2um ,请记住0.2um,这个数值就是显微镜水平与亚(超)微水平的分界线。; ∵显微镜的分辨力是有一定的极限, ∴其放大率受分辨力制约而不可能无限提高,普通光镜放大率的经验界值:有效放大倍数极限=物镜镜口率×1000。 例普通显微镜的油镜镜口率为1.25

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