takara pMD 19-T.pdf

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takara pMD 19-T

Code No. 6013 研究用 pMD?19-T Vector Cloning Kit 说明书 v201211Da 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 制品内容 1 ● 保 存 1 ● 纯 度 1 ● 用 途 1 ● pMD19-T Vector 的结构 1 ● 实验操作 2 ■ Control DNA 片段的克隆实验 2 ■ 一般 DNA 片段的克隆实验 2 ■ 一种可供选择的快速克隆法 3 ● 相关说明 4 ● 使用注意 4 ● QA 5 ● 制品说明 pMD19-T Vector 是一种高效克隆 PCR 产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由 pUC19 载体改建而成, 在 pUC19 载体的多克隆位点处的 Xba I 和 Sal I 识别位点之间插入了 EcoR V 识别位点,用 EcoR V 进行 酶切反应后,再在两侧的 3’ 端添加“T”而成。因大部分耐热性 DNA 聚合酶进行 PCR 反应时都有在 PCR 产 物的 3’ 末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高 PCR 产物的连接、克隆效率。 由于本载体以 pUC19 载体为基础构建而成,所以它具有同 pUC19 载体相同的功能。此外,本制品中的 高效连接液 Solution I 可以在短时间内(约 30 分钟)完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化, 大大方便了实验操作。本制品中的 Control Insert(500 bp)还可以用于 Control 反应。 本载体与 pMD18-T Vector 相比,本制品的 β-半乳糖苷酶的表达活性更高,菌落显示蓝色的时间缩短, 菌落显示的蓝色更深。因此,克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选。 ● 制品内容(2

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