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大专生物化学课件蛋白质组成性质及结构
生物化学实用技术 章宇宁;18世纪初,人们认识到一类“动物物质”的存在,认为这一类的物质组成了动物(包括人)的身体中柔软的部分
18世纪末,科学家证明这类物质中含有氮
1838年,科学家正式将这类物质定名为“protein”
该词来自希腊语,有“最重要”的意义;科学家对蛋白质的直观认识早于氨基酸
1806年第一个氨基酸被发现,但直到1920年,科学家才区别了必需氨基酸和非必需氨基酸,揭示了氨基酸和蛋白质之间的关系:
蛋白质是由氨基酸构成的;蛋白质是由氨基酸构成的
氨基酸中都含有__________________
组成蛋白质的主要元素是________________,有些蛋白质还含有一定量的_________。
____元素的含量在各种蛋白质中很接近,平均为____。这是蛋白质元素组成的特点,也是测定蛋白质含量的依据之一。;在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。 ;三聚氰胺(Melamine)(化学式:C3H6N6),俗称蛋白精,IUPAC命名为“1,3,5-三嗪-2,4,6-三氨基”,被用作化工原料。它无色,几乎无味,微溶于水(3.1g/L常温),可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等,不溶于丙酮、醚类。对身体有害,不可用于食品加工或食品添加物。;在皮革行业中,会有一些下脚料。它们是没有用的废料,但含有大量胶原蛋白。
用这样的废料来生产“水解胶原蛋白”,成本非常低
由于加工过程的卫生条件差、有毒重金属残留,造成严重危害
,“皮革奶”的检测并不困难。胶原蛋白中有大量的羟基脯氨酸,而牛奶蛋白中并不含有;牛奶蛋白中有一定量的色氨酸,而胶原蛋白中并不含有。 ;按分子形状分类
球状蛋白
纤维状蛋白
按分子组成分类
简单蛋白:无 非蛋白成分 可进一步按溶解度分类
结合蛋白:蛋白质+非蛋白成分 可进一步按辅基分类
;简单蛋白按溶解度分类;结合蛋白按辅基分类;如何“串起”氨基酸?;氨基酸脱水缩合形成肽;肽键:不能自由旋转,C、N、O、H及两边的C原子6个原子共平面,称为“酰胺面”,影响蛋白质结构
两个氨基酸相连就叫做二肽
二肽的两端可以继续和其他氨基酸反应,形成三肽、四肽、五肽……
少于10个氨基酸的肽叫寡肽,
多于10个氨基酸的肽叫多肽
某些小肽具有特别的生物活性;肽及肽键;氨基酸残基;物理性质千差万别
由氨基酸组成,保留了氨基酸的一些化学性质
具有本身的独特性质; 两性性质及等电点
胶体性质
沉淀作用
颜色反应
紫外吸收性质; ★蛋白质的等电点:蛋白质所带净电荷为零时,所处溶液的pH 值即为该蛋白质的等电点。;中性盐的存在常导致蛋白质的等电点发生明显的改变
实际测得的等电点与介质的离子组成有关
在不含任何盐的纯水中测得的等电点称为蛋白质的等离子点,是蛋白质的特征常数;蛋白质溶液具有胶体溶液的典型性质,如不能通过半透膜等。
常用透析法分离纯化蛋白质;★稳定蛋白质胶体溶液的主要因素:
①蛋白质表面极性基团形成的水膜(水化层)将蛋白质颗粒彼此隔开,阻止其相互聚集而沉淀
②蛋白质颗粒在非等电状态下,带同种电荷,互相排斥,不致聚集而沉淀;1、定义: 蛋白质的水膜或电荷一旦除去,蛋白质就会从溶液中沉淀下来
2、分类:
可逆沉淀:在沉淀过程中,蛋白质的结构和性质都没有发生变化,在适当的条件下,可以重新溶解形成溶液。
不可逆沉淀:在沉淀过程中,蛋白质的结构和性质都发生了变化,沉淀不可能再重新溶解于水;① 盐析法(中性盐沉淀法);盐析法(中性盐沉淀法):向蛋白质溶液中加入大量的中性盐,使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。常用中性盐有(NH4)2SO4、Na2SO4、NaCl等。;② 有机溶剂沉淀法:
常用与水互溶的有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等,破坏水膜,使其沉淀。;①重金属盐沉淀法
常用重金属盐有Hg2+盐、Pb2+盐、Cu2+盐等
②生物碱试剂沉淀法
常用生物碱试剂如单宁酸、苦味酸、钨酸等 ; 反应 试剂 颜色 反应基团
★双缩脲反应 NaOH,稀CuSO4 紫红 2个或2个以上肽键
★Folin酚试剂反应 CuSO4磷钨酸-钼酸 兰色 酚基
★茚三酮反应 茚三酮 兰紫色 游离氨基
Millon反应 Millon试剂 红色 酚基
黄色反应
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