新型志贺氏菌检测.ppt

志贺氏菌检测技术 ; 志贺氏菌是引起人类细菌性痢疾的病原 菌，仅引起人类的肠道内感染，对其他动物 均无致病力，可随患者的粪便污染外环境。 细菌性痢疾至今仍然是我国城乡最为常 见的肠道传染病,病人和带菌者是本病的传染 源，尤以非典型病例、慢性患者和带菌者在 流行病学上的意义更为重要。;主要内容;生物学性状 ;培养特性;生化特性;常以甘露醇和乳糖发酵特性来区分志贺菌的生化群;常以甘露醇和乳糖发酵特性来区分志贺菌的生化群 ;志贺菌属抗原分类;标本采集;水标本 直接增菌法:直接采集可疑水样450ml，加入50ml 10倍浓缩的GN增菌肉汤，37℃增菌6～8h。 过滤集菌法：采集水样500～1000ml用无菌滤膜（ 0.45～0.65μm）过滤，取下菌膜直接贴种于选择性平板培养过夜或无菌条件下剪碎后放入9mlGN增菌肉汤，37℃增菌6～8h后转种平板 。 吸附沉淀法;食品 固体：于广口瓶或无菌塑料袋中，实验室无菌称取25g样品，剪碎后加入225ml GN增菌肉汤中， 37℃增菌6～8h。 液体：采取食品50～100ml，实验室无菌称（量）取25g（ml）样品加入225ml GN增菌肉汤中， 37℃增菌6～8h。 乳粉类应以无菌操作取25g放入装有225ml灭菌盐水的三角瓶中，摇匀，37℃增菌6～8h。;血液: 当怀疑为菌血症时，静脉采集5~10ml血液，按1:10比例加入血增菌培养液中进行培养。;其他标本: 疑似痢疾爆发疫情病原学检测时 外环境样本可采集患者的污染衣物、剩饭菜、可疑食品、抹布、污水、井水等，采集的标本应立即按1：10的比例接种GN增菌肉汤，置37℃增菌6～8h。 媒介昆虫如苍蝇类，用消毒蝇拍拍打10~15只/份,装入9mlGN增菌肉汤中，尽快送实验室，置37℃增菌4～6h。;标本运送;分离培养;增菌分离 水、食品及其他标本于GN增菌肉汤中37℃增菌6~8h后，直接划线分离MAC及HE琼脂平板各一块，37℃培养18~24h。 ;在HE上为透明、白色或浅绿色菌落 。 在MAC上为无色（乳糖阴性） ，圆形，半透明，湿润、光滑、突起，大小为1～2mm的菌落。;初步生化反应 ;志贺菌属在TSI上的生化反应为：斜面红色，底层产酸黄色，不产气。 在KAI上斜面红色，底层产酸黄色，不产气或???少量气体，不产生H2S。 MIU：无动力、尿素酶阴性、靛基质阴性或阳性。 ;下列培养物可排除志贺菌： KIA斜面和底部均呈黄色或红色 有动力者 产硫化氢者 尿素酶阳性者 产生气体者（福氏志贺菌6型有时产少量气体） 在18～48小时发酵乳糖的培养物（宋内菌3～5天迟缓分解乳糖）;血清分型 ;系统生化鉴定;谢 谢