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样品类型 测序情况 可能造成的原因 建议解决的方案
测序情况正常,单反应的有效片段大于
测序完成。
800bp
重新挑取单克隆,进行菌落PCR或者双
测序完成,为空载体。 没有插入目的片段或者插入片段丢失。
酶切验证后送测。
测序情况正常,单反应的有效片段大于
测序完成,测通并拼接。
800bp;并完成结果拼接。
测序完成,测序结果中断,可
可能您的样品中含有高级结构,或GC含量 建议更换反向引物测序或者用高级试剂
能您的样品中含有高级结构,
较高。 盒测序。
或者GC含量较高。
1.可能样品含有高级结构,或GC含量较 建议:1.更换反向引物测序或者用高级
高; 试剂盒测序;
测序完成,测序结果衰减。
2.可能样品浓度较低,或样品不纯; 2.重新制备新鲜样品或提供高质量样品
3.可能样品出现降解。 。
建议更换反向引物测序。如双向都出现
测序完成,重复序列后出现双
您的目的片段中有重复序列。 此情况,建议根据目的序列设计引物测
峰/乱峰/衰减/中断。
序。
测序完成,插入后双峰,样品 模板中含有两个或两个以上的相同载体,
重新转化后挑取单克隆测序。
非单克隆。 但是插入片段不同。
测序完成,Poly(A/T/C/G) 建议更换反向引物测序。如双向都出现
结构后出现双峰/乱峰/衰减/ 您的目的序列中有连续的A/T/C/G。 此情况,建议根据目的序列设计引物测
中断。 序
建议:1. 更换反向引物测序或者重新
菌液、质粒 测序
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