第三章节转基因生物和基因打靶.pptVIP

*;转基因生物;第一节 转基因动物;转基因动物：以实验方法将外源基因导入动物染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。;▲1989年，意大利学者用精子作为载体转移目的基因，成功地获得了纯系转基因小鼠。 ;▲1999年2月，上海遗传研究所宣布转基因试管牛“滔滔”诞生，其体内被检测到带有人的血清白蛋白基因，这项成果被评为当年“中国十大科技进展”之一。;转基因超级鼠;超级奶牛体积比普通奶牛的大三倍 （英国）;上海转基因动物 ;东北农业大学－国内首例绿色荧光蛋白“转基因” 克隆猪;转绿色荧光蛋白的克隆兔;二、基本原理;转基因技术操作的具体流程;（二）重组载体的构建 选择合适的基因载体，要求载体序列不干扰外源基 因的表达、能接受外源DNA容量大小、稳定、对宿 主细胞无威胁。 （三）重组载体的体外验证（in vitro） 重组载体的正确性验证，如拷贝数、连接方向等。 对于连有组织特异性启动子或局部体细胞转染的载体 需先在同类型的体外离体培养细胞中初步验证表达特 性。;（四）基因转移 1）化学法 2）物理法 3）生物法 （五）转基因动物模型的验证 从基因组、mRNA、蛋白质和整体表型各个层次进行 验证。用核酸杂交、聚合酶链反应、免疫印迹杂交、 酶联免疫法、免疫荧光法和Western杂交法等多种方 法，筛选出有外源基因整合的阳性动物，传代后检测 外源基