第十章节植物细胞培养的基本过程和方法.pptVIP

第十章植物细胞培养的基本过程和方法;第一节 植物细胞的获取;1、外植体的选择：适当生长期的健康植株、细胞之间粘连程度小； 叶片组织 2、外植体的前处理： （1）冲刷材料; 流水 几分钟-数小时 吐温 (2) 表面浸润灭菌；超净台 70%酒精 10-30S （3）深层灭菌； 氯化汞 次氯酸钠 （4）无菌水冲洗。 3min/次 3-10次;二、通过愈伤组织诱导获取植物细胞;怎样从愈伤组织分离得到细胞？;第二节 悬浮培养（cell suspension culture） 悬浮培养是细胞培养的基本方法，是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基进行培养增殖的技术。 ; 1、悬浮细胞的诱导---愈伤组织诱导 要求：松散性好，增殖快，再生能力强。其外观一般是鲜艳的乳白或淡黄色，呈细小颗粒状，松散易碎。 适于悬浮培养 适于再生植株;如何获得符合要求的愈伤组织？ 1、选择适宜的外植体：胚、胚轴、子叶 是最常用的外植体，特别是幼胚。 2、选择适宜的培养基：生长素浓度很重要 配合一定浓度的细胞分裂素；添加附加物。 3、愈伤组织要进行继代选择：选择疏松性 好、细胞状态好的细胞不断继代培养。; 悬浮细胞生长动态：;细胞生长指标;;①