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选修三知识要点;专题一 基因工程;基因工程的概念： 指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过 和 等技术，赋予生物以新的 ，从而创造出更符合人们需要的新的 和 。由于基因工程是在 水平上进行的设计和施工，因此又叫做 。;一、DNA重组技术的基本工具;（一）限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1、来源：主要从 中分离纯化出来的。 2、作用：能够识别双链DNA分子的的某种 序列，并且使每一条链中 的两个核苷酸之间的 断开。 3、大多数限制酶的识别序列由 组成，例如，EcoRI、SmaI限制酶。少数限制酶的识别序列由 组成。 EcoRI限制酶识别的序列： 。 SmaI限制酶识别的序列： 。 一种限制酶只能识别 种核苷酸序列。 ;3、作用结果：产生 或 。 （1）黏性末端：在所识别序列的 分别切开时形成的。用 限制酶切割可获得黏性末端。 （2）平末端：在所识别序列的 处切开时形成。 用 限制酶切割可获得平末端。;（二）DNA连接酶——“分子缝合针”;DNA连接酶和DNA聚合酶的比较;（三）基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车” 1、作用：作为运载工具，将 转移到宿主细胞内。 2、常用的运载体有： 、 、 等。 3、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有 能力的很小的 DNA分子。;4、运载体必须具备的条件： （1）对受体细胞无害。 （2）携带外源DNA片段的运载体进入受体细胞后，在细胞中进行 或整合到 上，随其进行同步复制。 （3）有一个至多个 切割位点，供外源DNA片段插入其中。 （4）具有特殊的 ，供重组DNA的鉴定和选择。;二、基因工程的基本操作程序;步骤一：目的基因的获取 1、目的基因的概念：主要是指编码 的结构基因。 2、获取目的基因的方法 （1）未知基因的核苷酸序列时： 可从 中获取目的基因和 从 中直接分离。 （2）已知基因的核苷酸序列时： 利用 扩增目的基因和 利用 直接人工合成目的基因。;方法一：从基因文库中获取目的基因。 基因文库的概念：将含有某种生物 的许多 片段,导入受体菌群体中 ,各个受体菌分别含有这种生物的 ,称为基因文库。 基因文库种类： 和 。 基因组文库是一种生物的 基因。 部分基因文库是一种生物的 基因。 如 （互补DNA）文库。;从基因文库中得到所需的基因，是根据目的基因的有关信息。例如：根据基因的 、基因的 、基因 在 上的位置、基因的 、基因的表达产物 等特性来获取目的基因。 ;方法二：利用PCR技术扩增目的基因 ① 概念：PCR全称为 ，是在生物 复制 的核酸合成技术。 ②原理: 。 ③前提: 有一段已知目的基因的 序列，以便根据这一序列合成 。 ;④过程： → → → 。 a、变性（加热至90～95℃）： 双链DNA模板在热作用下， 断裂，形成 。 b、复性（冷却至55～60℃）： 系统温度降低，引物与单链DNA模板结合，形成局部 。 c、延伸（加热至70～75℃）： 在 的作用下进行