分子诊断项目课件.pptVIP

分子诊断室项目介绍;内 容;; PCR技术简介;PCR基本原理;DNA 合成的必备要素;定量PCR概念;常规PCR与定量PCR的比较;实时荧光定量PCR原理;Ct值与起始模板的关系;荧光定量的标准曲线 ;荧光检测模式;探针的5端标记一个荧光基团，3标记另一个荧光基团。5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团（FRET），正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。;当溶液中模板变性后低温退火时，引物与探针同时与模板结合。在引物的介导下，Taq酶沿模板向前合成子链，当延伸至探针结合处，发生链的置换；;Taqman探针原理;定量PCR在乙肝检测中意义;;标本留取及检测步骤;1.分区操作：PCR具有超敏感性，因此在检测过程中应分区操作，即分为试剂准备区，样品处理区，PCR扩增区。 2.试验前实验室应使用紫外消毒至少30分钟。 3.操作时戴一次性手套，加样头要求及时更换，吸液时避免飞溅。;4.每天实验前，在废物缸内套上塑料袋，加入半缸含有效氯1%次氯酸钠液，实验时将吸头、离心管丢入废液缸中浸泡。 5.所有试剂试验前充分融化，避免反复冻融。 6.每次PCR反应均应设立阴阳性对照。 ; 流式基本应用;流式细胞术的概念;流式细胞仪的检测范围;散射光信号;外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）;荧光信号;数据分析;流式的临床应用;淋巴细胞亚群分析;;;临床意