银屑病患者外周血整合素表达的研究x.docxVIP

网址： HYPERLINK  第  PAGE 4 页，共  NUMPAGES 4 页 银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测 银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测 中华皮肤科杂志 1998年第2期第31卷 论著摘要 作者：张开明　尹兴平　杨小英　周敏 单位：030009 山西省太原市中心医院 近年研究发现细胞间粘附分子(ICAM-1)在银屑病发病中有一定作用［1～4］，为此，我们采用ELISA法对34例银屑病患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行了测定，并对部分患者外周血单一核细胞(PBMC)ICAM-1表达进行了研究，现将结果报道如下。 一、病例和方法 (一)检测对象：取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者，共34例，其中男22例，女12例；年龄14～52岁，平均36岁；病程6天至24年；其中进行期寻常型银屑病16例，静止期寻常型银屑病15例，红皮病型银屑病2例，脓疱型银屑病1例。皮损程度计算按照PASI积分法［5］，病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者。正常对照组33例，为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例)，性别及年龄尽量与检测患者相同或相近。 (二)试剂：sICAM-1试剂盒为Medgenix公司产品，APAAP试剂盒为军事医学科学院基础所产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体为Zymed公司产品，购自北京中山试剂公司。 (三)方法： 1.血清sICAM-1测定：抽静脉血2ml，分离血清，置于-40℃备用待测，所有患者及对照组均是同步测定，采用双抗体夹心ELISA法，将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中，每孔25μl，均为复孔，每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗，20℃振荡 孵育2小时，弃去孔内液体，每孔加入洗涤液400μl，重复洗涤3次，之后每孔加入显色液200μl，20℃振荡 孵育30分钟，最后每孔加入50μl 1.8N H２SO４终止反应，置芬兰Labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(A值)，绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量(单位：ng/ml)。 2.PBMC ICAM-1染色：患者组为15例，对照组16例，抽静脉血后密度梯度离心，常规分离PBMC，离心涂片机涂片，采用APAAP法，最后于显微镜下计数300个有核细胞，然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(PBMC ICAM-1+%)。 3.统计学处理：采用SPSS软件包进行t检验及相关分析。 二、结果 1.银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果见附表。进行期血清sICAM-1水平(258.7±153.6ng/ml) 附表　银屑病患者血清sICAM-1水平 及PBMC ICAM-1+%结果 组别 sICAM-1 PBMC ICAM-1+% 例数 ±s(ng/ml) 例数 ±s(%) 银屑病组 34 232.2±66.2 15 20.0±7.4 对 照 组 33 185.0±42.1 16 12.0±3.9 t值 - 2.56 - 1.72 P值 - ＜0.01 - ＜0.05 与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较，t=2.63，P＜0.01，两组间有显著性差异，静止期与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sICAM-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml。 2.血清sICAM-1水平与PASI的关系经相关分析，r=0.56，P＜0.01，两者之间有显著的正相关关系。 三、讨论 ICAM-1是一种单链糖蛋白，与白细胞表面的LFA-1和Mac-1互为配体，主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面［1～3］，其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附，在炎症和免疫反应中有一定的作用［1］，sICAM-1是细胞膜表面的ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200ng/ml。Griffiths等［4］报道银屑病患者血清sICAM-1增高，我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sICAM-1水平与对照组比较明显增高(P＜0.01)，患者组PBMC ICAM-1+%与对照组比较明显增高。由于sICAM-1的主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体［1，2］，而血管内皮细胞表面可表达ICAM-1［1～4］，所以我们推测银屑病患者血清中增高的sICAM-1可能通过血管内皮ICAM-1竞争性地结