牛白介素32基因可变剪接体（IL-32γ）的分子克隆及功能验证.pdfVIP

? 一? 菇? 隶羹生鲁接谍攀鬟? 嚣? ? ? ?．? ～ ?????????????????????? 。? ?? 蹁 ? 研 究报 告? ??????? 牛 白介素 ??基因可变剪接体? 一????的分子克隆及功能验证? 魏育 蕾 程 祥 杨藩 张 军林 王华 岩? 西北农林科技大学动物医学院，杨凌 ??????? 通讯作者 ，?????????????．????? 摘? 要 牛 白细胞介素 ??????????????．??，／?一???基 因是近年发现 的一种新型功能基因，是一种炎症性细? 胞因子，其主要作用是诱导其他细胞因子和化学因子的产生，并在 自身免疫性炎症性疾病 中发挥重要作? 用，可促进细胞凋亡，从而抑制结核分支杆菌???????????????等多种分支杆菌感染，提高动物机体抗病能? 力。本研究从秦川?牛????????????脾脏组织中分子克隆了牛 儿一?? 基因及其可变剪接体 儿．???基因，经序? 列分析表明，该基因定位于牛 ??号染色体上，实验克隆的牛 见一? 基因与 ????中已发表序列有 ?个碱? 基不同，通过蛋 白二级序列比较 ，该差异并不影响蛋 白的折叠，推测这几个碱基差异是秦川黄牛 ????基? 因的 ???。／?．???比 ，，?一? 序列多了第二内含子 ，导致编码序列多编码 ??个氨基酸。为了研究该可变剪? 接体的功能，本研究构建了真核表达载体 ?????—?????．???。将该载体稳定转染小鼠??????????????巨噬? 细胞 ??????．?，获得超表达牛 儿．???基因的小鼠巨噬细胞 ，同时以稳定转染人 ??一???基因的小 鼠巨噬? 细胞 为 阳性 对照 ，????—????????检 测表 明，超表 达 牛 ／?一???具有 调节 ??．??、????、????、?????等细 胞 因? 子的功能，其趋势与阳性对照人 ??．???的趋势相近 。本实验研究为进一步研究牛 儿一???基因生物学功能? 打下 了基础 。? 关键 词 牛 ，白细胞 介素 ?????．???，分 子克 隆 ，巨噬细 胞 ，肿 瘤坏 死 因子??????? ???????????????????????????????????????????一??????????