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甘露醇 薄层色谱 （P2692） D．薄层色谱法（2.2.27） 供试品溶液：将25mg样品溶解于水（R）中，并用上述溶剂稀释至10mL。 对照溶液（a）：将25mg甘露醇对照品（CRS）溶解于水（R）中，并用上述溶剂稀释至10mL。 对照溶液（b）：将25mg甘露醇(R)和25mg山梨醇(R)溶解于水（R）中，并用上述溶剂稀释至10mL。 薄层板:硅胶薄层板。 展开剂：水-乙酸乙酯-丙醇（10:20:70体积比） 点样量：2uL 展开：超过薄层板的2/3. 干燥：空气中晾干 显色：将4-氨基苯甲酸溶液喷雾于薄层板上，130℃加热10min显色。 系统适用性：将对照溶液（b）按上述色谱条件展开，得到4个清晰分离的斑点。 结果：供试品溶液与对照溶液（a）按上述色谱条件开展，供试品溶液的主斑点的位置、颜色和大小应与对照溶液（a）中斑点基本一致。 2.2.27.薄层色谱法 薄层色谱法是一种分离技术，由适当物质作为固定相均匀涂布在玻璃、金属或塑料的支持物上。展开前供试品溶液点样在薄层板上。分离是基于吸附、分配、离子交换或组合这些机制，通过在一种或者某种适合的混合溶剂（展开剂）通过薄层（固定相），获得溶质（分析物）的位移（展开）的。 仪器 薄层板。色谱法按试剂（4.1.1）所述使用预涂布进行。 板的预处理。可能有必要提前洗涤板子便于分离。 这可以通过合适的溶剂偏移来完成。板子也可以被饱和通过诸如显影，浸渍或喷雾的程序来完成。在使用时，如果需要，可以通过以下方式活化板：在烘箱中在120℃下加热20分钟。 层析缸具有平底或双槽的惰性透明材料的展开缸，其尺寸适合于薄层板大小使用并提供有密闭的盖子。 水平展开槽用于流动相并且它还包含引导流动相至固定相的装置。 微量移液器，微量注射器，标定一次性毛细管或适合于适当的其它应用装置应用的解决方案。 荧光检测装置测量直接荧光或荧光的抑制。 显色装置。使用合适的装置，用于衍生化转移到薄层板，通过试剂喷雾，浸渍或蒸气熏蒸，以及在适用情况下帮助加热来使分离的组分可视化。 文档。 可以使用设备来提供可视化色谱图的文档，例如一张照片或一个电子文件。 方法 点样。在距离下边缘和板的侧面以及平行于下边缘的线上的适当距离处，加规定体积的溶液; 允许圆形斑点的中心之间至少10mm（在高效板上为5mm）和在带的边缘之间至少5mm（高效板上的2mm）的间隔。尽可能小的部分加溶液以获得直径为2-5mm（在高效板上为1-2mm）或者带宽为10-20mm（在高效板上为5-10mm）1-2mm的圆形斑点。在正常和高效板都使用的专著中，高效板的实验条件在正常板之后的括号[]中给出。 垂直展开。滤纸和展开缸壁成一条直线。将足够量的流动相倒入展开缸中，使滤纸浸渍之后，得到与待使用的板的尺寸相关的适当深度的量。对于色谱槽的饱和，更换盖子，并在20-25°C下放置1小时。除非专论中另有说明，色谱分离在饱和槽中进行。 如上所述应用规定的溶液。当溶剂从所应用的溶液中蒸发时，将薄层板放置在展开槽中，确保薄层板尽可能垂直，并且斑点或条带在流动相的表面上方。关闭色谱槽，保持在20-25°C和避光。封闭展开缸，将其保持在20-25°C，避光。 当流动相移动超过规定距离，测量加样点和展开剂前沿之间测量，移除薄层板。干燥并按规定检视色谱图。 对于双向色谱法，第一次展开后干燥薄层板，将薄层板转动90°，按第一次展开方法进行第二次展开。 水平展开。 如上所述加规定溶液。 当溶剂从所应用的溶液中蒸发时，用注射器或移液管将足够量的流动相引入展开槽中，在确认薄层板是水平的之后将其放置展开槽中，并根据制造商的说明连接流动相方向装置。如果规定，同时两侧展开薄层板。密封层析槽，避光放置在20℃-25℃下。待展开至规定距离取出薄层板，晾干，按规定检视色谱图。 对于双向色谱法，第一次展开后干燥薄层板，将薄层板转动90°，按第一次展开方法进行第二次展开。 检视 鉴别 供试品溶液色谱图上的主斑点与对照品溶液色谱图上对应的斑点比较颜色、大小和比移值（Rf） 比移值（Rf）的定义为是基线到展开斑点中心的距离与点样点至展开剂前沿的距离的比值 鉴别分离能力的验证 通常，试剂（4.1.1）中描述的适应性检查给出的性能是足够的。只有在特殊情况下，在专论中会有额外的性能标准。 有关物质检查 供试品溶液色谱中的除主斑点外的其它斑点与含杂质对照品溶液和供试品溶液自身稀释得到的对照品溶液中的相应斑点比较。 分离能力的验证。 分离能力验证的要求在相关专论中有规定。 检测能力的验证。 在大多稀释的对照品溶液的色谱图上的斑点或条带如果清晰可见，则认为检测能力良好。 定量测定 分辨率和分离度的要求在相关专论中有描述 由薄层色谱分离并且对紫外照射有反应的物质可以通过合适的仪器来直接在薄层板上检测。移动薄