三点苜蓿盲蝽线粒体Cyt b基因扩增条件研究.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 内蒙 古 师 范 大 学 学报 ?自然 科 学汉 文 版 ?? ???．?????．?? ?????年 ?月? ??????????????????????????????????????????? ?????????????????????????? ? ??． ????? ? 占 ? 一 ，??、?苜蓿 盲蝽 线 粒体 ?????基 因扩增 条 件 研 究? 吕秀 华? ?内蒙 古 师 范大 学 生 命 科 学 与 技 术 学 院 ，内蒙 古 呼 和 浩 特 ???????? 摘? 要 ：以 三 点苜 蓿 盲 蝽 为 材料 ，采 用 ???一 蛋 白酶 ? 消 化 法 提 取 其 基 因 组 ???，利 用 ??一?、??一?昆 虫 通? 用 特 异 性 引 物 对 线 粒 体 ?????基 因 ??????片 段进 行 ???扩 增 ，获 得 三 点 苜 蓿 盲 蝽 线 粒 体 ?????基 因 的 最 佳 扩 增? 条 件 ．? 关 键 词 ：三点 苜蓿 盲蝽 ；?????基 因 ；???；扩 增 条 件? 中 图分 类 号 ：?????? 文 献 标 志 码 ：?? 文 章 编 号 ：?????????????????????????? 三点 苜蓿 盲蝽 ?????????????? ????????????????????是一 种 危 害 十分 严 重 的 农业 害 虫 ，长 期 以 来一 直受? 到 昆虫工作 者 的重视 ，但 因其 个 体小 、身体柔 软 ，???提 取 较 为 困难 ，对 其 分 子生 物 学 的 系统研 究 尚未 见报? 道 ．本文对 三 点莒蓿 盲蝽线 粒体 ?????基 因 ??? 的扩增 条件进 行 反复探 索 ，并 获得 最佳方 案 ，为进 一 步从分? 子 水平上 探讨 三点苜 蓿盲蝽 遗传 多样 性 的成 因提 供方 法理 论依据 ．? ?? 实验 方 法 与材 料? 实验所 采用 的三点 苜蓿 盲蝽是 ?????????年 ?至 ?月 间采 自内蒙古 的无 水 乙醇浸 泡标本 ．采集 时将采? 到 的标 本立 即浸 于 ???? 乙醇 中 ，并更 换 ?～?次 ，放入 冰箱 于 ?℃保 存．基 因组 ??? 提 取参 照文 献 ??—??的? 方法 ．???扩增 的 目的片段 为线 粒体 ?????????编码 区 ?????的片段 ．以 昆虫通用 ??一?、??一?为特异 性引? 物．引物设计 参 照文献 ??—??，委 托上海 生工 生物 工程有 限公 司合 成．参 照文献 ??—??的实验 过程 ，对三点 苜蓿? 盲 蝽线 粒体 ?????基 因 ??? 的扩 增 条件进 行反 复探 索和改 进 ，得 到浓 度较 高的 特异 性 ???产 物．被试 三点? 苜蓿 盲蝽见 表 ?，引 物序列及 其位 置见 表 ?．? 表 ? 被试 三 点 苜 蓿 盲蝽? ???．???????????????????????????????????????????????? 表 ?? 引 物序 列 和位 置? ???．?? ???????????????????????????????