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— １０４ — 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第６期 张振良，郝德荣，陈国清，等．ＳＳＲ标记在糯玉米品种鉴定上的应用［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（６）：１０４ －１０６． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２ －１３０２．２０１６．０６．０２５ ＳＳＲ标记在糯玉米品种鉴定上的应用 １ １ １，２ １ １ １ ３ １ １ １ １ 张振良 ，郝德荣 ，陈国清 ，陆虎华 ，石明亮 ，冒宇翔 ，吴嘉点 ，黄小兰 ，程玉静 ，周广飞 ，薛　林 （１．江苏沿江地区农业科学研究所，江苏如皋２２６５４１；２．江苏省现代作物生产协同创新中心，江苏南京２１００９５； ３．江苏省农业委员会，江苏南京２１００３６） 　　摘要：采用ＮＹ／Ｔ １４３２—２０１４《玉米品种鉴定技术规程　ＳＳＲ标记法》中的２０对简单重复序列（ＳＳＲ）引物对市场 上抽检的苏玉糯１１、苏玉糯９０１、苏玉糯１３、苏玉糯１４、苏玉糯６３９ 等５ 个糯玉米品种进行真实性鉴定。结果表明，每 个抽检品种与标准品种至少有６ 个差异位点，这５ 个品种均与相应的标准品种不同；此外，ｕｍｃ１５４５ｙ２、ｕｍｃ１３３５ｙ５、 ｕｍｃ２１０５ｋ３、ｕｍｃ１７０５ｗ１、ｕｍｃ１１２５ｙ３、ｕｍｃ２００７ｙ４、ｐｈｉ０５３ｋ２、ｂｎｌｇ２３０５ｋ４等８对引物多态性较好，在今后糯玉米品种鉴定 中可优先采用。 　　关键词：糯玉米；ＳＳＲ标记；品种；鉴定；应用 　　中图分类号：Ｓ５１３．０３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０６ －０１０４－０２ 　　糯玉米因其营养丰富、风味独特、适口，越来越受到广大 取约０．２ ｇ玉米幼嫩叶片于液氮中研磨，转入２ ｍＬ离心 消费者欢迎。糯玉米种植面积越来越大，品种数量逐年上升， 管中，加入８００ Ｌ预热６５ ℃的ＣＴＡＢ提取缓冲液，混匀，水 μ 品种真实性鉴定需求也急剧增加。糯玉米育种中由于少数骨 浴６０ ｍｉｎ，每隔１０ ｍｉｎ小心摇动离心管；取出离心管，待冷却 干亲本的集中应用，造成品种间遗传基础狭窄，仅从形态上鉴 至２５ ℃，加入８００ Ｌ三氯甲烷 ∶异戊醇（２４ ∶１），小心充分 μ 定存在一定困难，给玉米品种的生产、经营、使用以及种子管 摇动试管至有机相呈深绿色，室温下于 ８ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心 理部门的监督带来一定挑战。随着ＤＮＡ 指纹图谱技术的发 １０ ｍｉｎ；用剪口的１ ｍＬ枪头将上清液转移到另一离心管中， 展，以简单重复序列（ＳＳＲ）为代表的分子标记技术逐渐成熟 加入 ２／３ 体积预冷 的异丙醇 （－２０ ℃），小心混匀； ［１ －２］ 并应用于农业种子生产研究和种子质量管理 。２０１４ 年， ８０００ ｒ／ｍｉｎ 离心２ ｍｉｎ，弃上清液，用５ ００ Ｌ７０％乙醇清洗 μ 中国农业部公布了一系列主要农作物品种鉴定的行业标准， ２次，弃上清液，干燥沉淀，加１５０ ＬＴＥ溶解。 μ 如ＮＹ／Ｔ １４３２—２０１４《玉米品种鉴定技术规程　ＳＳＲ 标记 １．３　ＰＣＲ扩增 法》、ＮＹ／Ｔ １４３３—２０１４《水稻品种鉴定技术规程　ＳＳＲ标记 根据 ＮＹ／Ｔ １４３２—２０１４《玉米品种鉴定技术规程　ＳＳＲ 法》，代替了２００７ 年公布的行业标准，使 ＳＳＲ标记技术对农 标记法》标准，选用 ｂｎｌｇ４３９ｗ１、ｕｍｃ１３３５ｙ５、ｕｍ