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基 因 工 程;第三章 基因工程的基本条件;一 用于核酸操作的工具酶;一 用于核酸操作的工具酶;*;*;*;*;1.3 限制性核酸内切酶;*;（二）限制性核酸内切酶的类型;（三）限制性核酸内切酶的命名;（四） II 型限制性核酸内切酶的基本特性;EcoRI等产生的5‘粘性末端;PstI等产生的3‘粘性末端;PvuII等产生的平头末端;*;;*;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;大部分II 型核酸内切酶需要相似的反应条件：;*;（五）影响限制性核酸内切酶活性的因素;（六） II 型限制性核酸内切酶酶解反应的操作;（六） II 型限制性核酸内切酶酶解反应的操作;*;*;*;同裂酶 （isoschizomers）： 通常将能切割同一靶序列的酶称为同裂酶，形成同样的末端。 有些同裂酶对于切割位点上甲基化碱基的敏感性有所差别，故可用来研究DNA甲基化作用。;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;2. DNA连接酶;2. DNA连接酶;2. DNA连接酶;2. DNA连接酶;*;2. DNA连接酶;*;*;*;*;*;*;*;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;*;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;*;*;*;TaKaRa TaqTM各种Taq酶的保真度比较 TaKaRa Ex TaqTM TaKaRa LA TaqTM TaKaRa Z-TaqTM PyrobestTM TaKaRa Polymerase Pfu DNA Polymerase 0 2 4 6 8 10 ;*;*;3. DNA聚合酶;3. DNA聚合酶;4. 核酸酶;4. 核酸酶;4. 核酸酶;*;*;4. 核酸酶;4. 核酸酶;4. 核酸酶;;4. 核酸酶;4. 核酸酶;5. 核酸修饰酶;TdT的基本特性：;*;*;5. 核酸修饰酶;5. 核酸修饰酶;*;*;*;*;*;*;*;二 用于基因克隆的载体;1 载体的功能及特征;1 载体的功能及特征;2. 质粒;2.质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;质粒不亲和性现象图解;2. 质粒;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;F因子带动Co1E1质粒转移的条件;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;*;2. 质粒;2. 质粒;2. 质粒;*;2. 质粒;3. 噬菌体或病毒DNA;3.噬菌体或病毒DNA;l 噬菌体生物学特性： 生物结构;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;*;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;*;*;T4噬菌体的体外包装;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.1 大肠杆菌的 l 噬菌体DNA;3.2 大肠杆菌的M13单链噬菌体DNA;3.2 大肠杆菌的M13单链噬菌体DNA;3.2 大肠杆菌的M13单链噬菌体DNA;3.噬菌体或病毒DNA;3. 噬菌体或病毒DNA;*;*;*;4. 考斯质粒与噬菌粒;4. 考斯质粒与噬菌粒;4. 考斯质粒与噬菌粒;4. 考斯质粒与噬菌粒;4. 考斯质粒与噬菌粒;4. 考斯质粒与噬菌粒;5. 人造染色体载体;5. 人造染色体载体;*;5. 人造染色体载体;*;*;5. 人造染色体载体;3 用于基因转移的受体菌或细胞;3.1 受体细胞应具备的条件;3.2 各种基因工程受体的特性;枯草杆菌;链霉菌;酵母菌;昆虫细胞（家蚕）;哺乳动物细胞（中国仓鼠卵巢细胞 CHO） ;植物细胞（拟南芥菜、烟叶） ;3.2 实验室常用的基因工程受体;*