102基因工程HPV疫苗.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（９）：１３０～１３４ 基因工程技术构建预防性 ＨＰＶ疫苗 龚业莉１，２　苏冬梅２　刘　颖２　夏焕章１ （１沈阳药科大学生命科学与生物制药学院　沈阳　１１００１６　２沈阳三生制药有限责任公司　沈阳　１１００２７） 摘要　宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）感染高度相关已得到公 认。利用基因重组技术开发 ＨＰＶ疫苗是目前预防宫颈癌唯一有效的方法。综述了近年来在基因工 程 ＨＰＶ疫苗研制中广泛应用的载体表达系统及其特点，依据密码子偏爱原则优化病毒外壳蛋白基 因序列显著提高外壳蛋白产量等方面的研究成果，以为进一步研制与优化 ＨＰＶ疫苗提供参考。 关键词　ＨＰＶ　疫苗　表达系统　密码子优化 中图分类号　Ｑ７８９ 　　高危型人乳头瘤病毒在人体内持续感染是引起宫 致癌性有关，其中 Ｅ６，Ｅ７常常成为治疗性疫苗的靶抗 颈癌的主要危险因素，已得到流行病学、分子生物学、 原；晚期 蛋 白 包 括 Ｌ１和 Ｌ２蛋 白，与 病 毒 的 增 殖 有 临床研究资料的证实，疫苗对预防和控制 ＨＰＶ感染及 关［２］。Ｌ１蛋白是主要的衣壳蛋白，其含量是 Ｌ２蛋白的 其引起的相关疾病具有重要意义。由于 ＨＰＶ具有种属 ３～５倍，含多个抗原表位，具有较强的免疫原性，能够 特异性，且不能在体外细胞培养，要获得该病毒的特异 诱导动物产生中和抗体。此特性决定了它常常被作为 性抗原，只能用重组 ＤＮＡ技术的方法制备基因工程疫 预防性疫苗的靶抗原。Ｌ１蛋白结构保守，只能产生特 苗。从第一株 ＨＰＶ病毒样颗粒组装成功到 Ｍｅｒｃｋ公司 异性抗体而没有交叉反应。Ｌ２蛋白虽然含量少但变异 的 ＨＰＶ１６／６／１１／１８四价疫苗和 ＧＳＫ公司的 ＨＰＶ１６／１８ 较多，可以产生交叉反应，且具有 Ｂ细胞抗原表位，可 二价疫苗投放市场，短短十几年时间，ＨＰＶ疫苗的研究 以在皮肤粘膜表面产生中和抗体［３］。 取得了突破性的进展。经临床试验证明其预防 ＨＰＶ短 　　预防性 ＨＰＶ疫苗是从衣壳蛋白 Ｌ１和 Ｌ２基础上研 暂及持续感染的疗效达到 １００％［１］。Ｍｅｒｃｋ公司该产 制出来的 ＨＰＶ病毒样颗粒（ＶＬＰ）。ＶＬＰ与天然病毒的 品 ２００６年市场销售额仅第一季度就高达 ７０００万美 粒子形态十分相似，但不含毒性，具有自行组装的能 元，显示了巨大的需求缺口和市场潜力。令人鼓舞的 力。并存在诱导中和抗体所必须的构象依赖性抗原表 是，我国自行研制的 ＨＰＶ疫苗不久也将面世。本文拟 位及 ＣＴＬ表位。在体内可以诱导特异性免疫反应，使 就预防性疫苗研究过程中的基因工程技术问题作如下 机体免受感染。动物实验表明，经接种免疫后 ＶＬＰ可 综述。 保护动物免受同种 ＨＰＶ的感染［４］。 　　构建 ＨＰＶ疫苗主要利用基因重组技术。首先从宫 １　ＨＰＶ结构特征及