手足口病的病原學及實验室检测.pptVIP

手足口病的病原学及实验室检测;手足口病的病原;人肠道病毒感染的一般致病机制;流行病学;实验室诊断——临床诊断病例符合下列条件之一者，即可诊断为实验室确诊病例 ;实验室诊断;病原学监测要求 ;;标本采集和检测 ;标本的选择; 采集标本的种类、保存和运输 ; 采集标本的种类、保存和运输 ; 采集标本的种类、保存和运输 ;（四）疱疹液 在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。所采集标本4℃暂存立即（12h内）送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。 ;（五）肛拭子标本 采集病人发病3日内的肛拭子标本，用于病原检测。用专用采样棉签，从患儿肛门轻轻插入，适度用力弧型左右擦拭数下，拔出后,迅速将棉签放入装有3－5ml保存液（含5%牛血清细胞维持液）的15ml外螺旋的采样管中，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖，并密封，以防干燥。 ;（六）尸检标本 采集脑、肺和肠淋巴结等重要组织标本，每一采集部位分别使用单独的消毒器械。每种组织应多部位取材，每部位应取2-3份约5-10g的组织，淋巴结2个，分别置于15ml-50ml无菌的有外螺旋盖的冻存管中，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。 ;（七）脑脊液标本。 出现神经系统症状的病例，可采集脑脊液标本，进行病毒分离或核酸检测。采集时间为出现神经系统症状后3天内，采集量为 1.0-2.0ml。采集后立即装入无菌带垫圈的冻存管中，4℃暂存立即(12h内)送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。但EV71感染神经系统时，很难在脑脊液中检测到EV71病原。 ;标本运输和贮存注意事项;实验室检测;病毒分离;咽拭子处理（病毒分离用）;病毒分离结果解释 ;测定人双份血清标本的中和抗体滴度;中和试验结果判定 ;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的标本处理;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） ;RT-PCR注意事项;RT-PCR注意事项;Real-time RT-PCR （rRT-PCR）;rRT-PCR注意事项;rRT-PCR结果判读;生物安全 ;生物安全;Thank you!