培养基质控制作业指导书.docVIP

培养基质量控制作业指导书 文件编号：  PAGE \* MERGEFORMAT 13 培养基质量控制作业指导书 1、目的： 为加强我中心检验科实验室的工作管理，保证实验室的检测质量，特制定此作业指导书； 2、范围： 本规范适用于实验室微生物检测中所使用培养基的质量控制。 3、职责： 3.1 检验人员：按照本规程规对培养基使用前及使用过程中进行质量控制，确保培养基符合相关标准的要求。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员对培养基进行质量控制。 4、控制措施： 4．1培养基的购置和验收 4.1.1 培养基的购置 试剂管理员在接到批准的采购信息后，从合格供应商中选择厂商采购，同时要求厂商提供每批培养基的批号、使用前的pH值、储藏信息、有效期、性能评价记录（包括测试菌株、技术数据清单、质控证书及必要的安全危害数据）。 4.1.2 培养基的验收 购买培养基到货后，由试剂管理员和微生物检测人员共同核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。同时应填写“培养基验收检查记录单”验收符合要求后，交由检测人员接受保管，填写培养基入库记录和建立试剂台帐。 2培养基的储存 干粉培养基应保存在阴凉干燥处，要避免阳光直射；开瓶后的干粉培养基易吸湿，应注意防潮并在有效期或6个月内用完。应每月对储存中的培养基进行常规检查，如容器密闭性复查、首次开封日期、内容物的感官检查，如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。开封的脱水培养基，每次使用前应对其质量进行检查，通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等判断培养基的质量变化。若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。即用性培养基按照产品标识要求进行储存。 3培养基的使用 4.3.1 配制培养基用水和玻璃器皿　　培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水，每周检测电阻率，每三个月检测一次重金属离子含量。制备培养基所用的玻璃器皿（如吸管、试管、烧杯等）新的玻璃器皿（首次使用）和再次使用的玻璃器皿按规定方法洗涤、干燥 4.3.2 称量 　　称量时要用专用的角匙，避免交叉污染而影响检验结果；干粉培养基易吸潮，如房间环境湿度较大时，应提高称量速度，完毕后及时盖紧瓶盖。 4.3.3 复水 　　复水时应注意以下事项： a）不得用铜锅或铁锅，以防有离子混入培养基中，影响微生物的生长； b）容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上，避免在加热溶解过程中，培养基溢出； c）加热培养基时一定要进行搅拌，特别是琼脂类培养基； d）为避免烧焦和沸腾溢出，对于少量的培养基最好使用沸水浴进行加热； e）含有琼脂粉的培养基，在加热溶解之前可以浸泡数分钟； f）对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，最多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去； g）烧糊的培养基营养物质被破坏，并可产生有毒物质，如发现焦化，或未溶解均匀前培养基有溢出，该培养基即不能使用，应重新制备。4.3.4 灭菌 　　培养基采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌），通常是121℃15min，含糖或特殊培养基，按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。已配制好的培养基必须在15分钟内灭菌，避免微生物生长繁殖而消耗养分，改变培养基的酸碱度。 为避免高温破坏培养基的营养成分，降低琼脂的凝胶强度，必须严格控制灭菌温度和时间，不可重复灭菌。 4.3.5 pH测定 　　在初次使用每批培养基时，均需随同检测配制一个测试培养基，在灭菌或消毒后应在25℃温度下采用精密PH 试纸测试PH值，并判断是否符合要求；使用过程中，如果需要调整培养基的pH，应用1mol/LNaOH或lmol/LHCL调整，注意不可反复调pH，否则会影响培养基的渗透压。 4.3.6 配制好的培养基标识和保存 灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。同时填写配制记录。内容：名称、配制量、配方（比）、操作中的重要参数（时间、压力、温度）、配制日期、配制者、截止使用日期。在每个已灭菌的培养基容器外做好标记，注明名称、配制日期、使用期限和配制人。 培养基保存注意事项： 1）环境条件：各种培养基均应在洁净的普通冰箱内保存，以2-8℃左右为宜，不得冻结。 2）保存时限: 基础培养基应在30天内用完。鉴别培养基应在21天内用完。选择性分离鉴别培养基制成平板后当日用完,置保鲜膜(袋)密闭保存期限可延长至一周