食品分析《维生素的测定》(第8章)技术总结.pptVIP

第8章：维生素的测定;;概 述; 这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在；它们不能供给机体热能。也不是构成组织的基本原料，主要功用是通过作为辅酶的成份调节代谢过程，需要量极小；它们一般在体内不能合成，或合成量不能满足生理需要，必须经常从食物中摄取；长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。 我们在评价食品的营养价值，开发利用高含量维生素的食品资源，指导人们合理调整膳食结构，指导制定加工工艺或贮存条件，最大限量地保留各种维生素，还要控制强化食品中加入量，防中毒，都离不开分析检测工作。; 化学方法：; 1．溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。 2．耐酸碱性：维生素A、D对酸不稳定， 对碱稳定，维生素E对碱不稳定，但在抗氧化剂存在下或惰性气体保护下，也能经受碱的煮沸。; 耐热性 氧化性 VA 好，能经受煮沸 易被氧化 （光、热 促进其氧化） V D 好，能经受煮沸 不易被氧化 V E 好，能经受煮沸 在空气中能慢慢被氧化 （光、热、碱促进其 氧化）; 皂化样品 水洗去除类脂物 有机溶剂提取脂溶性维生素(不皂化物) 浓缩 溶于适当的溶剂 测定。 在皂化和浓缩时，为防止维生素的氧化分解，常加入抗氧化剂(如焦性没食子酸、维生素C等)。 对于A、D、E共存的样品，或杂质含量高的样品，在皂化提取后，还需进行层析分离。 国际单位： IU （International Unit)  1 IU = 0.3μg VA = 0.025 VD = 1.79 μgβ-胡萝卜素 = 1.1mg α- VE = 3 μg VB;2、维 生 素 A 的 测 定;三氯化锑比色法测定VA;测定方法： 样品处理：脱脂，用皂化法；皂化----提取----洗涤----浓缩； 标准曲线绘制： 样品测定：反应在比色皿中进行。 注意事项： ★ 乙醇为溶剂的萃取体系，易发生乳化现象； ★ 所用氯仿中不应有水分，因三氯化锑遇水会出现沉淀，干 扰测定；故在每ml氯仿中滴加1滴乙酸酐，以保证脱水； ★ VA见光易分解，故整个操作要在暗处进行； ★ 每国际单VA相当于0.3ugVA。;注意事项： ★ 样品中的β-胡萝卜素会干扰测定，可将干样品用正已烷溶解，以氧化铝为吸附剂，丙酮-已烷混合液为洗脱剂进行层析分离； ★ 三氯化锑腐蚀性极强； ★ VA含量高的样品可直接加无水硫酸钠研磨后，加乙醚提取，加三氯甲烷溶解后即为待测的处理样品； ★ 显色剂除用三氯化锑外，还可用三氟乙酸、三氯乙酸。;紫 外 分 光 光 度 法 测 定 VA;胡 萝 卜 素 的 测 定;β—胡萝卜素的结构如下：;样品的提取与洗涤：注意植物油和高脂肪样品先要皂化； 样品的浓缩与定容：在有氮气环境中浓缩，但不要浓缩得太干； 纸层析： 点样：在基线（距低端4CM处）上取四点，分别在二点间 带状点样； 展开：以饱和过的石油醚为展开剂，进行上行展开； 洗脱：剪下胡萝卜素色带，置于5ml具塞试管中，用力振摇， 使色素完全溶解； 比色测定：以石油醚为空白，于450nm处比色测定； 标准曲线的绘制：; ★ 此法为国标方法，方法简单、最小检出限为0.11ug； ★ 浓缩时要防止蒸干，同时要在充氮条件下进行； ★ 层析分离也可用柱层析，效果好，但费时； ★ 一般用专用的中速滤纸； （GB/T 5009.83—2003 ）第一方法是HPLC；第二方法为纸层析法。;维 生 素 D 的 测 定;三氯化锑比色法测定VD;三氯化锑比色法测定VD;维 生 素 E 的 测 定;比 色 法 测 定 维 生 素 E; ★ VE在碱性条件下易被氧化，因此需在N2气流中皂化，并可加入 焦性没食子酸作为抗氧化剂； ★ 处理前应将其它可使三价铁还原为二价铁的还原性物质去除； ★ 发色剂除用联氮苯外，也可用4，7-二苯