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不同频率电刺激对蟾蜍腓肠肌收缩的影响 （浙江中医药大学） 【摘要】：目的：本实验在刺激时间和刺激强度恒定的条件下，研究不同频率的刺激对腓肠肌收缩的影响。 方法：将装置与蟾蜍坐骨神经腓肠肌相连，采用自动频率方法，强度为2V，相隔时间为10s。起始频率为1HZ，按1HZ,11HZ,21HZ,31HZ......逐渐增加,根据曲线图,观察不同频率时肌肉收缩形态和张力变化。结果：随着刺激频率的增加，曲线上增波幅度由大变小，出现单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩的情况。结论 在有效刺激强度条件下，某较小频率使腓肠肌发生单收缩。当频率增大，单收缩变为不完全强直收缩，频率继续增大，不完全强直收缩变为完全强直收缩。 【关键词】刺激；频率；腓肠肌 肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。不同组织、细胞的兴奋表现各不相同，神经组织的兴奋表现为动作电位，肌肉组织的兴奋主要表现为收缩活动。因此，观察肌肉是否收缩可以判断它是否产生了兴奋。一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度-时间变化率三要素有关。[1]此实验通过观察在刺激时间和强度恒定的条件下，所用电刺激频率与腓肠肌收缩曲线的关系进而分析不同刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。 【实验材料】： （1）实验对象：蟾蜍 （2）实验试剂：任氏液 （3）实验工具：蛙板、锌铜弓，探针，粗剪刀、尖镊子、玻璃分针、瓷碗、培养皿 （4）实验仪器：铁支架、 微调固定器、刺激输出线、肌动槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集系统。 【实验方法】： 1、实验系统连接和参数设置：点击“实验”菜单，选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”项。参数：通道模式为张力，扫描速度为2.5s/div，灵敏度为1.5g，时间常数为直流，在“选择”下拉菜单中选择“频率”项，显示刺激参数。 2、 离体蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备 2、1毁脑脊髓 取蟾蜍一只，用左手握住，以食指压住其前头部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨打孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退回，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动消失，四肢松软。 2、2剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手将剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷碗内， 2、3剥皮 避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。 2、4洗净双手和用过的全部手术器械，再进行下列步骤。 2、5分离双腿 避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开。将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。 2、6游离坐骨神经 取腿一条，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用大头针将标本背位固定于干净蛙板上。用玻璃分针循股二头肌和半肌膜之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半肌腱、半膜肌肌腱 ，并绕至前方剪断股四头肌腱。自上而下剪断所有坐骨神经分支。将连着3~4节椎骨的坐骨神经分离出来。 2、7完成坐骨神经小腿标本 将已经游离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所有大腿肌肉，在距膝关节约约1cm处剪断股骨。弃去上段股骨，保留部分即为坐骨神经小腿标本。 2、8完成坐骨神经腓肠肌标本 用尖头镊子在上述坐骨神经腓肠肌标本的跟腱下方穿孔，穿线结扎之。提起结扎线，在结扎线下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，左手握住标本的股骨部分，使已游离的坐骨神经和腓肠肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸进腓肠肌与小腿之间，在膝关节处剪断，与小腿其余部分分离。左手保留部分即为附着于股骨之上的、具有坐骨神经支配的腓肠肌标本。将标本浸入盛有新鲜任氏液之培养皿中待用。 2、9将腓肠肌跟腱的扎线固定在张力换能器臂梁上，不宜太紧，此连线应与桌面垂直，调节微距调节器，将前负荷调至2~5g。 2、9、1把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，应保证神经与刺激电极接触良好。 3、实验菜单中选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响” 4、选择菜单中选择“强度/频率显示刺激参数” _ 5、实验观察：刺激频率按1HZ，11HZ，21HZ，31HZ，逐渐增加，连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察肌肉收缩形态和张力的改变 【实验结果】： 使刺激强度不变，调节刺激频率，观察到刺激频率对骨骼肌收缩的影响，如图一。 图一 不同频率电刺激对蟾蜍腓肠肌收缩的影响 由图一可以得出当刺激频率较小，刺激的间隔大于第